Volumen 79 Número 1 - Sociedad Argentina de Oftalmología

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Luengo Gimeno, Federico Resultados In vitro se obtuvieron neomembranas epiteliales con estratificación de 2 a 3 capas celulares, de elasticidad y resistencia adecuada para su implante sobre la superficie ocular. El proceso se realizó en 21 días a partir de la toma de biopsia limbar (Figura 1). Modelo de DSCL con Quemaduras por Álcalis La reparación en el modelo con quemaduras dependió de la severidad de la lesión previa. Al mes, la totalidad de los animales recobraron una cornea sin neovascularización y de transparencia mayor a la evidenciada en el preoperatorio. A los 3 meses postoperatorios, se evidenciaron penachos de neovascularización que debieron ser tratados con láser argón. A los 6 meses, tres animales de cinco recobraron un aspecto clínico normal con transparencia del 100% y sin neovascularización, mientras los otros dos animales presentaron una mejoría notable con respecto al estado preoperatorio. Al año de sobrevida, los animales presentaban una cornea de características clínicas e histológicas normales (Figura 2). Modelo de DSCL con Queratectomía Laminar Profunda incluyendo Limbo Las corneas con DSCL sin quemaduras recobraron una cornea de características normales e histoarquitectura sin alteraciones con respecto a una cornea normal. Los animales del grupo control presentaron neovascularización corneal a partir de los 60 días e histológicamente se evidenció reepitelización de la superficie estromal aunque con mayor movilización de fibroblastos, aumento del número de mitosis del epitelio y pobre estratificación corneal (Figura 3). Discusión Hemos realizado un estudio experimental de transplante autólogo y heterólogo de células epiteliales corneales en conejos con lesiones corneales que imitaban un estado de insuficiencia total y parcial de células limbares. Como opción [ 16 ] terapéutica de estas patologías fue posible desarrollar membranas con células epiteliales corneales a partir de una pequeña biopsia del limbo esclero-corneal. El grupo de conejos autólogo, que presentaba signos clínicos de DSCL total (invasión de vasos en 360º, opacidad corneal e irregularidades del epitelio corneal) obtuvo una gran mejoría al mes del postoperatorio. Sin embargo, en todos ellos se observó reinvasión de vasos en el tejido corneal. Seis conejos mejoraron con el tratamiento de fotocoagulación, usando el sistema de oftalmoscopia indirecta con láser argón (6 0 mv de intensidad y 0,3 seg. de exposición) sobre los neovasos, realizando disparos por fuera de la cornea. Finalmente se logró que un par de conejos llegasen a los 12 meses con una cornea transparente, sin vasos en el tejido corneal. El grupo heterólogo, que presentaba una DSCL parcial, tras el implante de epitelio corneal, tuvo una reparación histoarquitectónica corneal favorable con respecto a aquella encontrada en el grupo control que presentó neovascularización corneal, producto del estado deficitario de SC. No se utilizaron inmunosupresores, salvo dexametasona 0.1% durante 10 días. Se sugiere de esta manera la histocompatibilidad entre tejidos homólogos. 13 Resultado con posibilidades de ser tomado en cuenta en los casos en donde la patología corneo-limbar es bilateral y la toma de una muestra de células troncales para su posterior replicación se vea imposibilitada. De esta manera, hemos podido llevar a cabo un desarrollo biotecnológico, con resultados que sugieren efectuar un trabajo experimental de mayor duración, así como también evaluar la posibilidad de realizar un estudio piloto en pacientes que puedan beneficiarse de este tratamiento.
Implante de epitelio corneal organotípico en el tratamiento del déficit de stem cells limbares Figura 1: Aspecto histológico de una membrana cultivada antes de ser aplicada sobre la superficie estromal (Hematoxilina y eosina 40X) Figura 2: Evolución clínica de un conejo con DSCL por quemaduras por álcalis. Se evidencia la vascularización y la opacificación corneal en el preoperatorio (A), la aplicación de la membrana cultivada (B), los primeros 30 días postoperatorios (C). A los 60 días del implante se observa la neovascularización (D) que fue tratada con láser argón y al decimosegundo mes postoperatorio (E) la superficie corneal se hallaba clara y sin signos de déficit limbar. En la imagen (F) se observa la correlación histopatológica (hematoxilina y eosina, X40) y en la imagen G se evidencia el limite corneo-limbar respetado. A B F C D E G [ 17 ]
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