Volumen 79 Número 1 - Sociedad Argentina de Oftalmología

incubado y lavado para remover el anticuerpo no
unido. Luego del lavado fue realizada la reacción
de color con tetrametilbencidina (TMB, Sigma) y
H2O2, la cual fue frenada con H2SO4 1N antes de
leer las absorbancias en lector de placa a 4 0nm
y comparadas con controles de concentración
conocida.
Cuantificación de subclases de IgG
Las subclases de IgG fueron cuantificadas por
ELISA de acuerdo a métodos previamente descriptos
[11] con algunas modificaciones. En resumen,
las microplacas fueron preincubadas con
anticuerpo anti Fc subclase γ1, γ2, γ3 y γ4 (Minineph,
Binding Site), lavadas con PBS-Tween
0.0 % y bloqueadas con PBS-Tween-albúmina
0,01%. Posteriormente fue agregado a cada reservorio
100 µl de lágrimas en diluciones que
variaron entre 1:100 y 1:1000 de acuerdo a la
subclase a estudiar, incubado a 37ºC por 2 horas,
lavado con PBS-Tween e incubado nuevamente
con anti cadena γ total humana de carnero marcada
con peroxidasa (Binding Site, Birmingham,
UK). La reacción de color fue realizada como se
indicó previamente, y luego de frenada fue leída
en lector de microplaca a 4 0nm.
Análisis Estadístico
Desviaciones estándar de la media fueron calculadas
entre niños infectados y no infectados. El
estudio de significación estadística fue calculada
mediante el test t de Student.
Resultados
Agente etiológico causante de conjuntivitis
En los niños de 3- meses sin dacrioestenosis y
con dacrioestenosis congénita asociada a conjuntivitis
se realizaron cultivos bacteriológicos e
inmunomarcaciones con anticuerpos monoclonales
para Herpes simplex 1, Herpes simplex 2,
Chlamydia trachomatis y Adenovirus.
La tabla I muestra que 41/66 controles no
mostraron infección bacteriana ni viral y que
2 /41 niños de este grupo mostró el desarrollo
de S.epidermidis en el cultivo sin presentar estos
últimos infiltrado inflamatorio conjuntival
ni diagnóstico oftalmológico de conjuntivitis. A
Primera infancia y dacrioestenosis congénita:
marcada desviación hacia respuesta no protectiva
Th2 frente a ciertas infecciones conjuntivales
este grupo se lo denominó normal (no infectados).
En contraste, los niños con dacrioestenosis
mostraron infección bacteriana o viral en todos
los casos estudiados. Se observó que los cocos
fueron encontrados con mayor frecuencia en
estos niños (1 0/191). La frecuencia de las infecciones
con bacilos fue sensiblemente menor
que para cocos (30/191), en sólo 11/191 casos se
encontraron agentes virales. En /10 casos (2
casos de Streptococcus, 1 caso de Enterobacter,
2 casos de Herpes simplex 1) se observó el desarrollo
paralelo de S.epidermidis (resultados no
mostrados). En estas situaciones el S epidermidis
fue descartado como agente patógeno debido a
ser considerado no patógeno frente al otro microorganismo
aislado de las conjuntivas.
De los resultados observados en estos niños
se decidió dividir a los niños estudiados en cuatro
grupos: normal, cocos, bacilos y virus (Figura 1).
Linfocitos y neutrófilos en secreción lagrimal
de los grupos estudiados
La lágrimas de los niños de 3- meses fueron centrifugada
y el sedimento colocado en portaobjetos
y coloreado con May Grünwald-Giemsa para
analizar la presencia de neutrófilos, Linfocitos y
eosinófilos en las secreciones. Los resultados,
clasificados de +1 a +4 para cada tipo celular de
acuerdo a la cantidad de células por campo, se
muestran en la Figura 2.
El grupo de niños con cocos mostró marcada
presencia de neutrófilos cuando se comparó con
el grupo control (P