DEPARTAMENTO DE NUTRICION Y BROMATOLOGíA II ...

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3.2. ESTUDIO DE LOS METODOS DE ANALISIS DE AZUCARES SOLUBLES 3.2.1. Cromatoilrafía Líquida de Alta Eficacia (HPLC Para evaluar el método (Wilson y col., 1981) se ha sometido a ensayos de exactitud y precisión, así como al estudio de la resolución que se obtiene. a) Ensayo de exactitud Para realizarlo se ha establecido el contenido cuali- y cuantitativo de azúcares en las hortalizas objeto de estudio. Se ha comprobado la presencia de fructosa, glucosa y sacarosa. Con arreglo a las proporciones observadas en cada hortaliza se han adicionado a la muestra diferentes cantidades de la solución de azúcares patrón. Tras realizar las diluciones adecuadas se ha realizado diez veces la determinación para cada mezcla de patrones. - Fructosa:25 mg, Glucosa:25 mg, Sacarosa:50 mg, en 25 mL. correspondiente a zanahoria y remolacha que representa una relación de F:G:S (0.5:0.5:1) - Fructosa: 25 mg, Glucosa: 50 mg, Sacarosa: Smg, en 25 mL, correspondiente a nabo que representa una relación de F:G:S (0.5:1:0.1). Los resultados obtenidos son: Tabla XVII. Ensayo de exactitud del método de Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) para la determinación de azúcares solubles. Monosacáridos ¡xg/25 ~~1 X + SD CV (%) Fructosa 25 103,72 + 3 16 3,05 Glucosa 25 100,25 + 4 04 4,03 Sacarosa 50 102,49 + 0 30 0,29 Fructosa 25 100,20 + 0 28 0,28 Glucosa 50 104,08 + 0 26 0,25 Sacarosa 5 94,00 + 1 00 1,06 7c) coeficiente de varmaclon X + SO valor medio + desviación estándar; CV ( 191
Los porcentajes de recuperación son óptimos en todos los casos, aunque se puede indicar qtíe cuando la sacarosa se encuentra en pequeña proporción dicha recuperación es algo inferior. b) Ensayo de precisión Se aplica el método diez veces sobre diferentes fracciones del mismo material. Los resultados obtenidos son los siguientes: Tabla XVIII. Ensayo de precisión del método de Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) para la determinación de azúcares solubles. X+SD CV(%) Fructosa 0 575 + 0,028 4,87 Glucosa 0 627 + 0,019 3,03 Sacarosa 1 750 + 0,05 2,86 X + SP = valor medio + desviación estándar; CV (%) = coeficiente de variación Los coeficientes de variación de los resultados obtenidos en las diferentes determinaciones indican que la precisión del método es adecuada. c) Resolución de la columna ~Bondapack Carbohydrate Analysis El estudio de la separación de los azúcares se ha llevado a cabo con una mezcla de fructosa glucosa y sacarosa. Se emplea la columna pBondapack Carbohydrate Analysis de Waters como se indica en el apartado 2.3 de la Parte Experimental. 192
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UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID F
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2.3. DISCUSION DE LOS RESULTADOS OB
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- BRILLOUET, J.M. (1982). Nonstarch
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- DEVRIES, J.W.; HEROFE, J.C. y EGB
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ESAU, K. (1976). Anatomía Vegetal.
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HECKMAN, M.M. y LANE, S.A. (1981).
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- LEE, S.C.; PROSKY, L. y DEVRIES,
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- MORRISON, I.M. (1980). Hcmicellul
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