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CIENCIA Y<br />
TECNOLOGÍA<br />
extractos brutos (0.5 ml) se mezclaron concienzudamente con reactivo de Folin-<br />
Ciocalteu 0.2 N recientemente preparado (2.5 ml), seguido de 2.0 ml de carbonato de<br />
sodio al 7.5% (Na2CO3) y se incubaron en la oscuridad durante 2 horas. La mezcla de<br />
reacción de absorbancia se midió a 760 nm. El ácido gálico (ácido gálico, 97%, CAS:<br />
149-91-7, Sigma-Aldrich, St. Louise, MO, EE. UU.) se utilizó como estándar y los resultados<br />
se expresaron en mg equialente a ácido gálico (GAE) por g de muestra.<br />
Propiedades antioxidantes<br />
La capacidad antioxidante de las muestras se midió mediante el ensayo DPPH (2.2-<br />
difenil-1-picrilhidrazilo) según lo descrito por Floegel et al., 2011 [27] con algunas modificaciones.<br />
Brevemente, se mezclaron 0.5 ml de extracto bruto con 1 ml de solución<br />
monofónica de DPPH 0,1 nM (CAS: 1898-66-4, Sigma-Aldrich, St. Louise, MO, EE.UU.)<br />
recién preparada y se incubó en la oscuridad a temperatura ambiente durante 30<br />
minutos. La absorbancia de la mezcla de reacción se midió a 517 nm.<br />
Para calcular el la capacidad de absorción se usó trolox (CAS: 53188-07-1, ACROS<br />
Organics , Morris, NJ, EE. UU.) como estándar y el resultado se expresó como μmol equivalente<br />
de trolox (TE) por g de muestra.<br />
La capacidad de absorbanción del radical de oxígeno (ORAC) se determinó según lo<br />
descrito por Floegel et al., 2011 con algunas modificaciones.<br />
Enseguida, se mezclaron 25 μL de extracto diluido con 150 μL de fluoresceína 10 nM en<br />
el pocillo de la microplaca y se incubaron durante 30 min a 37°C de temperatura.<br />
Veinticinco microlitros de solución de dihidrocloruro de AAPH (2,2-azobis (2-<br />
amidinopropano)) (CAS: 2997-92-4, Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, USA) se añadieron<br />
a la mezcla de reacción preincubada. Se midió la fluorescencia (excitación 485<br />
nm, emisión 510 nm) desde la microplaca inferior cada 60 s durante un total de 60 min.<br />
Los datos se analizaron utilizando el software de análisis de datos Omega MARS (versión<br />
del programa 3.02 R2, BMG Labtech, Mornington, Australia), con el fin de calcular la<br />
capacidad antioxidante, el trolox fue utilizado como estándar y los resultados se expre-<br />
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