72841-Platelia Toxo IgM.pdf - BIO-RAD

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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A R3 S5 S13
B R4 S6
C R4 S7
D R5 S8
E S1 S9
F S2 S10
G S3 S11
H S4 S12
7. Couvrir la microplaque d’un film adhésif en appuyant bien sur toute la
surface pour assurer l’étanchéité. Puis incuber immédiatement la
microplaque au bain-marie thermostaté ou dans un incubateur sec de
microplaques pendant 1 heure ± 5 minutes à 37°C ± 1°C.
8. A la fin de la première incubation, retirer le film adhésif, aspirer le contenu de
toutes les cupules dans un conteneur pour déchets contaminés (contenant
de l’hypochlorite de sodium) et procéder à 4 lavages avec 350 µL de la
Solution de Lavage (R2). Sécher les barrettes par retournement sur une
feuille de papier absorbant et taper légèrement afin d’éliminer la totalité de
la Solution de Lavage.
9. Distribuer immédiatement 200 µL de la solution de travail du conjugué (R6)
dans toutes les cupules. Agiter délicatement cette solution avant l’emploi.
10. Couvrir la microplaque d’un film adhésif neuf en appuyant bien sur toute la
surface pour assurer l’étanchéité. Incuber la microplaque au bain-marie
thermostaté ou dans un incubateur sec de microplaques pendant 1 heure
± 5 minutes à 37°C ± 1°C.
11. A la fin de la deuxième incubation, retirer le film adhésif, aspirer le contenu
de toutes les cupules dans un conteneur pour déchets contaminés
(contenant de l’hypochlorite de sodium) et procéder à 4 lavages avec
350 µL de la Solution de Lavage (R2). Sécher les barrettes par retournement
sur une feuille de papier absorbant et taper légèrement afin d’éliminer la
totalité de la Solution de Lavage.
12. Distribuer rapidement, et à l'abri de la lumière vive, 200 µL du Chromogène
(R9) dans toutes les cupules. Laisser la réaction se développer à
l’obscurité pendant 30 ± 5 minutes à température ambiante (+18-30°C).
Lors de cette incubation, ne pas utiliser de film adhésif.
13. Arrêter la réaction enzymatique en ajoutant 100 µL de la Solution d’Arrêt
(R10) dans chaque cupule. Adopter la même séquence et le même rythme
de distribution que pour la solution de révélation.
14. Essuyer soigneusement le dessous des plaques. Lire la densité optique à
450/620 nm à l’aide d’un lecteur de plaques dans les 30 minutes qui suivent
l’arrêt de la réaction. Les barrettes doivent toujours être conservées à l’abri
de la lumière avant la lecture.