Janvier 2003

Les fragments issus du traitement par le CNBr (nommés BCI , BC2, BC3 en fonction de leurpositionnement à partir du N terminal du peptide X) sont soumis à une chromatographie en phase inversepermettant l'obtention d'un mélange BCI et BC2 séparé de BC3.Le mélange BC1 et BC2 est soumis ensuite à une chromatographie échangeuse d'ions en utilisant ungradient de pH allant de 3 à 9 de manière à séparer BC1 de BC2.2°) Quel type d'échangeur d'ions peut-il utiliser en suivant cette procédure (nature et zone de pKa) . Quelest l'ordre d'élution des 2 tétrapeptides ?3O) Quel est le nom de la technique électrophorétique équivalente à cette expérience? Comment secomporteraient les deux fragments (BC1 et BC2) si on dépose le mélange initial au milieu du gel?Question nI :La cinétique d'une enzyme E en fonction de son substrat S est suivie en absence et en présence du peptideX ( 1,5 mM ) . Les résultats sont consignés dans le tableau ci dessous:S (mM) vi ( sans X) en UAJmin vi (avec X) en UAJmin1 20 102 34 205 60 4010 80 6015 90 7220 96 8025 100 861°) En fonction des résultats de ce seul tableau, déterminer l'influence exercée par X sur la cinétique de Eet son type parmi les 2 cas principaux possibles.La Vmax de la série sans X est égale à 120 UA (unités arbitraires) par min.2°) En déduire la constante de dissociation du complexe E-X. Indiquer si E a plus d'affinité pour S oupour X.2ème PARTIE (Alain DRIOU) : Durée conseillée: 40 min1.1 La liaison peptidique dans une chaîne polypeptidique présente des caractéristiquesparticulières. Ses caractéristiques ont des conséquences majeures sur le squelettepolypeptidique, notamment:- sa rigidité construit un squelette peptidique défini et stable;- les libertés de rotation de certains atomes lui permettent d'adopter différentesconformations dans l'espace.Justifier et argumenter ces 2 affirmations? (utilisation de schémas recommandée)