HYPERTONIA ÉS NEPHROLOGIA - eLitMed.hu
HYPERTONIA ÉS NEPHROLOGIA - eLitMed.hu
HYPERTONIA ÉS NEPHROLOGIA - eLitMed.hu
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
26 WAGNER ZOLTÁN <strong>ÉS</strong> MUNKATÁRSAI <strong>HYPERTONIA</strong> <strong>ÉS</strong> <strong>NEPHROLOGIA</strong><br />
oxidatív stressz (%)<br />
kalciumakkumuláció<br />
120<br />
100<br />
80<br />
60<br />
40<br />
20<br />
0<br />
120<br />
100<br />
80<br />
60<br />
40<br />
20<br />
0<br />
MG MG +<br />
SOD<br />
MG MG +<br />
SOD<br />
MG +<br />
kataláz<br />
MG +<br />
Trolox<br />
Wavelength Time Scan System<br />
(Hitachi, Tokyo, Japán) programot<br />
használtuk.<br />
A vvt-szuszpenzió dichlorofluoreszcein<br />
és Fura-2-AM eredetû fluoreszcenciáját<br />
10 percig rögzítettük. A mérés<br />
elsõ percének végén ferrovasat (pozitív<br />
kontroll) vagy MGO-t injektáltunk<br />
a küvettába. Az antioxidánsokat<br />
a mérés elején adtuk a vvt-szuszpenzióhoz.<br />
Az antioxidánsok végkoncentrációja<br />
a következõ volt: szuperoxiddizmutáz<br />
(SOD): 200 nemzetközi<br />
egység (NE)/ml; kataláz: 2000 NE/<br />
ml; trolox (E-vitamin-analóg, lipidperoxidáció-gátló):<br />
0,1 mM; deszferrioxamin<br />
(mely a ferrovasat ferri<br />
vassá oxidálja, és a ferrivas megkötésével<br />
meggátolja a vas redox ciklusát): 1<br />
mM; redukált glutation (GSH): 5<br />
mM. Eredményeinket 6 független mérésbõl<br />
számolt átlag standard deviáció<br />
(SD) formájában adtuk meg. A<br />
statisztikai értékeléshez a Student-féle<br />
kétmintás t-tesztet használtuk.<br />
Vörösvértest morfológiai vizsgálatainkhoz<br />
az izolált vvt-eket háromszor<br />
mostunk 7,4-es pH-jú, 5 mM glükóztartalmú<br />
fiziológiás sóoldatban. A<br />
mosott vvt-eket 7,4-es pH-jú, 5 mM<br />
glükóztartalmú Ringer-oldatban reszuszpendáltuk.<br />
A mosott vvt-szuszpenzió<br />
hematokritját sejtszámláló segítségével<br />
0,1%-ra állítottuk. A vvtszuszpenziót<br />
szobahõmérsékleten 1<br />
mM MGO-val inkubáltuk 10, 20 és 30<br />
MG +<br />
SOD +<br />
kataláz<br />
MG +<br />
Trolox<br />
MG +<br />
Desferal<br />
MG +<br />
Desferal<br />
MG +<br />
GSH<br />
MG +<br />
DSH<br />
2. ábra. A metilglioxál (MG) hatására kialakuló oxidatív stressz (felsõ panel) és kalcium<br />
akkumuláció (alsó panel) antioxidánsokkal gátolható. A kalcium akkumuláció esetében<br />
nem tudtuk vizsgálni a kataláz hatását, mivel a kataláz önmagában is befolyásolta a<br />
Fura-2-AM fluoreszcenciáját. Az ábrán hat független mérés átlagát (SD) tüntettük fel<br />
és 1 mM metilglioxál hatását vettük 100%-nak. Az 1 mM metilglioxál hatásához viszonyítva<br />
minden esetben szignifikáns csökkenés alakult ki az antioxidánsok hatására<br />
(p