18.11.2013 Views

HYPERTONIA ÉS NEPHROLOGIA - eLitMed.hu

HYPERTONIA ÉS NEPHROLOGIA - eLitMed.hu

HYPERTONIA ÉS NEPHROLOGIA - eLitMed.hu

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

26 WAGNER ZOLTÁN <strong>ÉS</strong> MUNKATÁRSAI <strong>HYPERTONIA</strong> <strong>ÉS</strong> <strong>NEPHROLOGIA</strong><br />

oxidatív stressz (%)<br />

kalciumakkumuláció<br />

120<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

120<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

MG MG +<br />

SOD<br />

MG MG +<br />

SOD<br />

MG +<br />

kataláz<br />

MG +<br />

Trolox<br />

Wavelength Time Scan System<br />

(Hitachi, Tokyo, Japán) programot<br />

használtuk.<br />

A vvt-szuszpenzió dichlorofluoreszcein<br />

és Fura-2-AM eredetû fluoreszcenciáját<br />

10 percig rögzítettük. A mérés<br />

elsõ percének végén ferrovasat (pozitív<br />

kontroll) vagy MGO-t injektáltunk<br />

a küvettába. Az antioxidánsokat<br />

a mérés elején adtuk a vvt-szuszpenzióhoz.<br />

Az antioxidánsok végkoncentrációja<br />

a következõ volt: szuperoxiddizmutáz<br />

(SOD): 200 nemzetközi<br />

egység (NE)/ml; kataláz: 2000 NE/<br />

ml; trolox (E-vitamin-analóg, lipidperoxidáció-gátló):<br />

0,1 mM; deszferrioxamin<br />

(mely a ferrovasat ferri<br />

vassá oxidálja, és a ferrivas megkötésével<br />

meggátolja a vas redox ciklusát): 1<br />

mM; redukált glutation (GSH): 5<br />

mM. Eredményeinket 6 független mérésbõl<br />

számolt átlag standard deviáció<br />

(SD) formájában adtuk meg. A<br />

statisztikai értékeléshez a Student-féle<br />

kétmintás t-tesztet használtuk.<br />

Vörösvértest morfológiai vizsgálatainkhoz<br />

az izolált vvt-eket háromszor<br />

mostunk 7,4-es pH-jú, 5 mM glükóztartalmú<br />

fiziológiás sóoldatban. A<br />

mosott vvt-eket 7,4-es pH-jú, 5 mM<br />

glükóztartalmú Ringer-oldatban reszuszpendáltuk.<br />

A mosott vvt-szuszpenzió<br />

hematokritját sejtszámláló segítségével<br />

0,1%-ra állítottuk. A vvtszuszpenziót<br />

szobahõmérsékleten 1<br />

mM MGO-val inkubáltuk 10, 20 és 30<br />

MG +<br />

SOD +<br />

kataláz<br />

MG +<br />

Trolox<br />

MG +<br />

Desferal<br />

MG +<br />

Desferal<br />

MG +<br />

GSH<br />

MG +<br />

DSH<br />

2. ábra. A metilglioxál (MG) hatására kialakuló oxidatív stressz (felsõ panel) és kalcium<br />

akkumuláció (alsó panel) antioxidánsokkal gátolható. A kalcium akkumuláció esetében<br />

nem tudtuk vizsgálni a kataláz hatását, mivel a kataláz önmagában is befolyásolta a<br />

Fura-2-AM fluoreszcenciáját. Az ábrán hat független mérés átlagát (SD) tüntettük fel<br />

és 1 mM metilglioxál hatását vettük 100%-nak. Az 1 mM metilglioxál hatásához viszonyítva<br />

minden esetben szignifikáns csökkenés alakult ki az antioxidánsok hatására<br />

(p

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!