Nov-Dez - Sociedade Brasileira de Oftalmologia

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Avaliação da microbiota ocular em pacientes com disfunção do filme lacrimal333INTRODUÇÃOOfilme lacrimal, além de lubrificar a superfícieocular, tem a importante função de protegê-lacontra a ação de vários patógenos. A lágrimacontém proteínas como a lisozima, a lactoferrina,imunoglobulina A, entre outras substâncias, que exercematividade antimicrobiana (1-3) .Além disso, a mucinaproduzida por células caliciformes da conjuntiva promoveuma barreira física que impede tanto a aderênciacomo a penetração de muitos patógenos através doepitélio da superfície ocular (1-3) . Seal et al. mostraramque existe redução tanto da lactoferrina quanto dalisozima na lágrima de indivíduos com disfunção do filmelacrimal (4) .Alguns estudos demonstraram um aumento daatividade da enzima metaloproteinase-9 no epitéliocorneano, em resposta à insuficiência do filme lacrimal,e que resultou em perda das “tight junctions” da barreiraepitelial corneana (5) . A deficiência do filme lacrimalaliada à fragilidade epitelial corneana em olhos secospodem facilitar a instalação de infecções oculares.Terapias anti-inflamatórias como esteróides tópicose ciclosporina A têm sido prescritas em vários casosde disfunção do filme lacrimal, com melhora dos sintomas.A administração de imunomoduladores pode, contudo,alterar a atividade imune na superfície ocular, aumentandoassim a predisposição à infeçcão (1) .A oclusão de ponto lacrimal com plugs é umaopção terapêutica em casos de disfunção do filme lacrimal,uma vez que diminuem a drenagem lacrimal atravésdos canalículos (1, 6, 7) . Apesar de ser um método relativamentefácil e seguro, há estudos mostrando bactériascapazes de formar um biofilme aderente à superfície doplug (6) .O objetivo deste estudo foi avaliar a microbiotaconjuntival em olhos com disfunção do filme lacrimal, ea modificação desta microbiota pela colocação do plugde silicone no canalículo inferior.MÉTODOSNesta série de casos intervencionais não comparativosforam avaliados 68 olhos de 41 pacientes (29 dosexo feminino, e 12 do sexo masculino) portadores dedisfunção do filme lacrimal, durante o período de 2002 a2007. Os critérios de exclusão foram pacientes em usode antibioticoterapia ou de terapias anti-inflamatóriascomo corticóides ou imunossupressores tópicos ousistêmicos. Foram incluídos pacientes com diagnósticode disfunção do filme lacrimal em tratamento somentecom lágrimas artificiais. O diagnóstico de disfunção dofilme lacrimal foi feito pela presença de pelo menos umdos sintomas (sensação de olho seco, ardor ou dor ousensação de corpo estranho, prurido e lacrimejamento),associados aos achados de exame oftalmológico(biomicroscopia avaliando-se conjuntiva e córnea, tempode rompimento do filme lacrimal e teste com coloraçãovital rosa bengala).Na biomicroscopia anterior foram valorizados sinaiscomo presença de hiperemia conjuntival, muco,oleosidade excessiva do filme lacrimal, e de ceratitefilamentar. Tempo de rompimento do filme lacrimal inferiora 10 segundos foi considerado indicativo dedisfunção do filme lacrimal (8) . No teste com coloraçãovital rosa bengala foi instilada 1 gota da solução a 1% eo paciente foi orientado a piscar várias vezes. Para interpretaçãodo resultado, sob luz anerita verde, a superfícieocular foi dividida em 3 partes: conjuntiva bulbar nasale temporal e córnea. Cada área foi graduada de 0 a 3pontos, em que “0” significava ausência de coloração e“3” correspondia à coloração confluente, para um máximode 9 pontos em cada olho. Olhos com valores superioresa 3 pontos foram considerados portadores dedisfunção do filme lacrimal (9) .Durante o estudo, houve 22 pacientes (30 olhos),do total de 41 pacientes (68 olhos), que precisaram recorrerà oclusão de ponto lacrimal com plug de silicone.Estes pacientes foram submetidos à cultura de amostrascolhidas do fundo-de-saco conjuntival antes e após ummês da oclusão do ponto lacrimal inferior.Colheita e CulturaTodos os pacientes tiveram amostras, para cultivo,obtidas do fundo-de-saco da conjuntiva inferior, comzaragatoa estéril; o material foi imediatamente inoculadoem Brain heart infusion broth (BHI broth) (Difco, LePont de Claix/France) e encaminhado ao laboratório.Após apresentar turbidez, as amostras de BHI foramsemeadas em meios sólidos de ágar sangue de carneiroa 5% (AS) (Difco, Le Pont de Claix/France) e ágar chocolate(AC) (Difco, Le Pont de Claix/France) para posterioridentificação dos microrganismos presentes.A sensibilidade aos antimicrobianos oxacilina,amicacina, tobramicina, ciprofloxacino, ofloxacino,gatifloxacino e moxifloxacino foi testada pelo métodode disco difusão de acordo com as recomendações doClinical Laboratory Standards Institute (CLSI, Filadélfia,EUA) e determinação das concentrações inibitóriasmínimas por Etest ® (AB Biodisk, Solna, Suécia). Todo oRev Bras Oftalmol. 2009; 68 (6): 332-7
334Tomimatsu MM, Barbosa MMVC, Yu CZ, Hirai FE, Höfling-Lima ALprocessamento das amostras e as respectivas análisesmicrobiológicas foram realizados no laboratório demicrobiologia ocular do departamento de Oftalmologiada Universidade Federal de São Paulo.Análise estatísticaDados foram apresentados pela frequência, pelasmédias ± desvios-padrão ou proporções. Para comparaçãode variáveis categóricas foi utilizado o teste exatode Fisher. Valores de p ≤ 0,05 foram considerados estatisticamentesignificantes. A análise foi realizada com osoftware Stata v.10 (College Park, Texas).RESULTADOSA idade dos pacientes incluídos no estudo varioude 20 a 88 anos com média ± desvio-padrão de 58,0 ±15,71 e mediana de 59 anos; 70,73% eram do sexo femininoe 29,27%, do masculino.Dos 68 olhos avaliados, 21 tiveram cultivos negativose 47 apresentaram crescimento bacteriano nasamostras colhidas. Nove diferentes espécies de bactériasforam identificadas: Staphylococcus coagulase negativa(SCN) em 34 amostras (66,66%), StaphylococcusTabela 1Microbiota dos 47 olhos com disfunção do filme lacrimal com cultura positivaBactéria Frequência %Staphylococcus coagulase negativa 34 66,66Staphylococcus aureus 7 13,72Corynebacterium sp 3 5,86Enterobacter aerogenes 2 3,92Corynebacterium xerosis 1 1,96Streptococcus hemolítico do grupo viridans 1 1,96Proteus mirabilis 1 1,96Serratia sp 1 1,96Alcaligenes xylosoxidans 1 1,96Total 51* 100* Dentre as 47 amostras, quatro tiveram crescimento de duas bactérias distintasTabela 2Microbiota dos olhos com cultura positiva antes e após o implante de plug*Bactéria Pré-plug % Pós-plug %Staphylococcus coagulase negativa 16 64 19 70,38Sensível à oxacilina 14 87,50 14 73,68Staphylococcus aureus 4 16 1 3,70Sensível à oxacilina 4 100 1 100Corynebacterium sp 1 4 1 3,70Serratia sp 1 4 1 3,70Streptococcus hemolítico do grupo viridans 1 4 3 11,12Alcaligenes xylosidans spp 1 4Corynebacterium xerosis 1 4Citrobacter feundii 1 3,70Moraxella nonliquefaciens 1 3,70Total 25 100 27 100*Alguns olhos apresentaram crescimento de mais de uma bactéria, conforme detalhado na Tabela 3Rev Bras Oftalmol. 2009; 68 (6): 332-7
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