生物制品分离制备技术实验指导 - 沈阳农业大学网络教学平台

加 入 肾 上 腺 素 后 , 继 续 保 温 2min, 然 后 立 即 在 480nm 处 测 定 光 密 度 。 对 照 管 和 样 品 管的 光 密 度 值 分 别 为 A 和 B。在 上 述 条 件 下 ,SOD 抑 制 肾 上 腺 素 自 氧 化 50% 所 需 的 酶 量 定 义 为 一 个 酶 活 力 单 位 。 即 :酶 活 力 ( 单 位 )=2(A-B)N/A式 中 ,N—— 样 品 稀 释 倍 数 ;2—— 抑 制 肾 上 腺 素 自 氧 化 50% 的 换 算 系 数 。五 、 实 验 结 果根 据 提 取 液 、 粗 酶 液 和 酶 液 的 酶 活 力 和 体 积 , 计 算 纯 化 提 取 率 。六 、 注 意 事 项1、 酶 液 提 取 时 , 为 了 尽 可 能 保 持 酶 的 活 性 , 尽 可 能 在 冰 浴 中 研 磨 , 在 低 温 中 离 心 。2、 肾 上 腺 素 容 易 被 氧 化 , 故 操 作 时 要 尽 量 快 。以 对 单 糖 混 合 液 进 行 分 离 。 以 纤 维 素 作 为 支 持 物 , 把 它 均 匀 地 涂 布 在 玻 璃 板 上 成 一 薄 层 ,然 后 在 此 薄 层 上 进 行 层 析 即 为 纤 维 素 薄 层 层 析 。 纤 维 素 是 一 种 惰 性 支 持 物 , 它 与 水 有 较 强的 亲 和 力 而 与 有 机 溶 剂 亲 和 力 较 弱 。 层 析 时 吸 着 在 纤 维 素 上 的 水 是 固 定 相 , 而 展 层 溶 剂 是流 动 相 。 当 欲 被 分 离 的 各 种 物 质 在 固 定 相 和 流 动 相 中 的 分 配 系21