Diplomarbeit - GSI

2.2 Bestrahlung der Zellen
2.2.1 Bestrahlung mit Röntgenstrahlen
2.2 Bestrahlung der Zellen
Die Zellen wurden in einer IV320-13 Röntgenröhre (Seifert, Deutschland) mit Dosen
zwischen 5 und 50 Gy bestrahlt. Die Spannung betrug 250 kV und der Strom 16 mA.
Die Dosimetrie erfolgte mit einem SN4 Dosimeter (PTW Freiburg, Deutschland). Die
Kalibrierung erfolgte nach Fricke (Barr, 1961). Es wurde durchschnittlich mit ein bis
zwei Gray pro Minute bestrahlt, wobei die Zellen in ihrem Kulturmedium verblieben.
Es wurden immer unbestrahlte Kontrollen mitgeführt, die den gleichen Bedingungen wie
die bestrahlten Proben ausgesetzt waren.
2.2.2 Bestrahlung mit Schwerionen
Die Bestrahlung mit Xenon-, Kohlenstoff- und Nickel-Ionen erfolgte mit dem Linearbe-
schleuniger UNILAC bzw. dem Synchrotron SIS der GSI Helmholtzzentrum für Schwe-
rionenforschung GmbH. Die ausführlichen Bestrahlungsdaten sind in Tabelle 2.1 aufge-
führt.
Für eine vertikale Bestrahlung wurden die Zellen in Petrischalen (∅ 32 mm) kultiviert.
Für die Bestrahlung wurde zunächst das konditionierte Medium gesammelt und anschlie-
ßend wurden die Petrischalen in ein Bestrahlungsmagazin mit Kulturmedium (RT) ohne
Zusätze vertikal eingesetzt.
Für die fast horizontale Schrägbestrahlung wurden Zellen auf 24 x 24 mm Glasplättchen
ausgesät und in Petrischalen kultiviert. Die Bestrahlung erfolgte in speziellen Plexiglas-
blöcken, sodass der Zellrasen unter einem Winkel von 4° bestrahlt wurde. Maximal 9
Blöcke wurden in ein spezielles Magazin eingesetzt und mit Kulturmedium ohne Zusätze
aufgefüllt. Durch die Schrägbestrahlung konnten Proteinakkumulationen entlang des Io-
nenstrahls untersucht werden.
Nachdem die Proben in die Kammern eingesetzt waren, wurden sie zur biologischen Be-
strahlungsanlage gebracht und eingesetzt. Ein computergesteuerter Roboterarm hob je-
weils eine Probe vertikal aus dem Magazin heraus, hielt die Probe für einige Sekunden
in den Strahl, bis die gewünschte Dosis erreicht war und setzte die Probe anschließend
wieder in das Magazin. Während die Proben bestrahlt wurden, waren die Zellen für einen
kurzen Zeitraum nur mit einem dünnen Mediumfilm bedeckt. Danach wurden die Pro-
ben mit konditionierten Medium, bis zu ihrer Aufarbeitung, überschichtet. Der Zeitraum
zwischen Einladen der Proben in ein Magazin, der Bestrahlung selbst und dem anschlie-
ßenden Ausladen betrug ca. 20 Minuten.
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