PLATELIA™ ASPERGILLUS Ag - Bio-Rad

1- VORGESEHENE VERWENDUNG
Platelia Aspergillus Ag ist ein „Sandwich“-Mikrotiterplatten-Enzymimmunoassay zum Nachweis von
Aspergillus Galactomannan Antigen in Serumproben von Erwachsenen und Kindern sowie in
bronchoalveolärer Lavage (BAL) Proben.
Platelia Aspergillus Ag Assay dient in Verbindung mit anderen Diagnoseverfahren, wie zum Beispiel
mikrobiologischer Kultur, histologischer Untersuchung von Biopsieproben und bildgebenden Verfahren
(Röntgennachweis), der Unterstützung in der Diagnose von invasiver Aspergillose.
2- VERWENDUNGSZWECK
Platelia Aspergillus Ag ist ein „Sandwich“-Mikrotiterplatten-Enzymimmunoassay zum Nachweis
von Aspergillus Galactomannan Antigen in Serumproben von Erwachsenen und Kindern sowie in
bronchoalveolärer Lavage (BAL) Proben.
Platelia Aspergillus Ag Assay dient in Verbindung mit anderen Diagnoseverfahren, wie zum
Beispiel mikrobiologischer Kultur, histologischer Untersuchung von Biopsieproben und
bildgebenden Verfahren (Röntgennachweis), der Unterstützung in der Diagnose von invasiver
Aspergillose.
3- ZUSAMMENFASSUNG UND ERLÄUTERUNG
Aspergillus-Infektionen beginnen normalerweise in der Lunge durch Einatmen von Aspergillus-
Sporen aus der Umwelt. Die schwersten Verläufe werden von invasiven Formen einer Infektion
ausgelöst, deren Häufigkeit in den letzten 10 Jahren angestiegen ist. Invasive Aspergillosen treten
hauptsächlich bei neutropenischen Patienten (infolge einer Krebstherapie) sowie bei Patienten auf,
die mit Immunsuppressiva (nach Organtransplantationen, besonders Knochenmarktransplantationen)
und Kortikosteroiden behandelt werden 10 .
Nur selten wird Aspergillus aus Blutkulturen isoliert, weshalb die Diagnose oft auf unspezifischen
diagnostischen oder radiologischen Nachweisen (klinischen Symptomen, CT, Thoraxröntgen, etc.)
basiert.
Der Nachweis von löslichem Galactomannan-Antigen in Serum ist dagegen eine geeignete
serologische Methode, die Diagnose von invasiver Aspergillose zu unterstützen 9, 12, 23, 54, 62 .
Zusätzlich erweist sich der Nachweis des Galactomannan-Antigens in bronchoalveolärer Lavage
(BAL) bei Organtransplantierten bei der Diagnose invasiver Aspergillose in dieser Population als
hilfreich 8,17,18 .
4- TESTPRINZIP 45
Platelia Aspergillus Ag ist „Sandwich“-Mikrotiterplatten-Enzymimmunoassay zum Nachweis von
Aspergillus Galactomannan Antigen in Serum und BAL. Der Assay verwendet den Ratten EBA-2
monoklonalen Antikörper gegen Aspergillus Galactomannan, der bereits in früheren Studien
beschrieben wurde 25, 46 .
Die monoklonalen Antikörper werden sowohl als Festphase (Beschichtung der Mikrotiterplatten)
bzw. zur Bindung des Antigens als auch zum Nachweis des gebundenen Antigens
(Konjugatreagenz: Peroxidase-gekoppelte, monoklonale Antikörper) eingesetzt. Die Serumproben
oder BAL-Proben werden in Gegenwart von EDTA stark erhitzt (gekocht), um die Immunkomplexe
zu dissoziieren und Serumproteine, die möglicherweise mit dem Test interferieren könnten, auszufällen 24 .
Die behandelten Serumproben und das Konjugat werden in die mit monoklonalen Antikörpern
beschichteten Vertiefungen gegeben und inkubiert. Bei Vorhandensein von Galaktomannan-
Antigen bildet sich ein Komplex aus monoklonalem Antikörper - Galaktomannan - monoklonalem
Antikörper / Peroxidase. Zur Entfernung von jeglichem, nichtgebundenem Material werden die
Vertiefungen gewaschen. Anschließend wird die Chromogen TMB-Lösung zugegeben. Diese
reagiert mit den an die Vertiefungen gebundenen Komplexen unter Blaufärbung. Die Enzymreaktion
wird durch Zugabe von Säure gestoppt, wodurch die blaue Farbe nach Gelb umschlägt. Die
optische Absorption von Proben und Kontrollen wird mit einem Spektrophotometer gemessen,
das auf die Wellenlängn 450 und 620 nm eingestellt ist.
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