pdf-Version

Titration von 755 mg Glycin (nach Zugabe von NaOH bis zum Erreichen von
pH 12,5) mit 1 M HCl. Rot: Markierungen im Messprotokoll, blau: siehe
Text.
Bei τ = 0,5 ist der erste Pufferpunkt erreicht (im Messprotokoll HP2), bei
dem gleiche Anteile Glycinat und Glycin vorliegen. Dabei ist die Hälfte des
Glycinats an seiner basischsten Position, der Aminogruppe, protoniert
worden – aus der Hälfte des Glycinats ist das Zwitterion H3N + CH2COO −
entstanden. Bei HP2 wird auf der Ordinate der pKS2-Wert abgelesen, der
Säurekonstante der Ammoniumfunktion (9,89; vgl. 9,78 in Voet & Voet,
Biochemistry).
Die weitere Titration führt zu EP2. Hier ist alles Glycinat protoniert, so dass
nur noch das Zwitterion vorliegt – der isoelektrische Punkt ist erreicht. Bis
hierher wurden 1 mol Protonen zu 1 mol Glycinat zugefügt, der
Titrationsgrad ist 1 (τ = 1). Wurde die Aminosäure eingewogen, so ergibt
der Quotient aus der Einwaage in mg und der zugegebenen Menge Protonen
in mmol die Molekülmasse der Aminosäure. Da bei Glycin an diesem
Äquivalenzpunkt das Zwitterion vorliegt, liegt hier auch der isoelektrische
Punkt (IP) des Glycins, auf dessen Bestimmung weiter unter eingegangen
wird.
Bei der weiteren Titration wird ein zweiter Pufferpunkt und ein zweiter
Äquivalenzpunkt erwartet. Im Vergleich mit einem verwandten Ampholyten
wie Ammoniumacetat sind die meisten Aminosäuren aber so sauer, dass die
Carboxylfunktion bei den üblichen Konzentrationen durch die zugesetzte
Salzsäure nicht mehr protoniert wird und bei τ = 2 kein Wendepunkt mehr zu
erkennen ist. Aus diesem Grund ist auch die Bestimmung von pKS1, der
Säurekonstanten der Carboxylfunktion, beim zweiten Pufferpunkt (τ = 1,5)
mit einer höheren Unsicherheit behaftet als die Bestimmung von pKS2. Im
35