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Methoden - Kapitel 3.3.
3.3. Histologie
Für die Beurteilung der Knochenbinnenstruktur wurde aus den linken Femora (falls
nicht vorhanden: rechte Femora, im Einzelfall Humeri) der Individuen mittels einer
Dentalbohrmaschine (Dremel®Multi TM ) mit aufgesetztem Diamantsägeblatt (Horico)
ein etwa 1 x 2cm großes Stück der anterioren Diaphysenmitte herausgesägt. Die Proben
wurden in Silikonformen gebettet, mit einer Mischung aus 100 Gewichtsteilen
des erwärmten Epoxidharzes „Biodur® E12“ mit 28 Teilen des Härters „Biodur®
E1“ überschichtet und für drei Tage ausgehärtet. Nach Entfernung der Einbettungsformen
wurden die Präparate zunächst getrimmt und anschließend mit Hilfe eines
Sägeschnittmikrotoms (Leitz SP 1600) planparallele Dünnschnitte angefertigt (Abb.
3.2). Diese wurden, nach einer Qualitätskontrolle unter dem Mikroskop, zwischen
Objektträgern getrocknet und dabei zur Vermeidung von Aufwerfungen gepresst.
Die Schnitte wiesen dabei Stärken zwischen 80µm und 120µm auf, abhängig von der
Qualität des Knochens. Die trockenen Dünnschnitte wurden unter Verwendung des
Einschlussharzes Eukitt® auf Objektträger aufgeklebt und mit einem Deckglas fixiert.
Nach einer erneuten 24stündigen Trocknung in horizontaler Lage erfolgte die
Auswertung am Durchlichtmikroskop bei 40-facher Vergrößerung. Durch Einsatz
eines Polarisationsfilters konnte eine stärkere Kontrastierung der Präparate erreicht
werden. Zur besseren Einordnung in die Altersklassen wurden die Präparate mit
Dünnschnitten von Referenzserien bekannter Altersklassen und den jeweiligen mikrostrukturellen
Merkmalen verglichen.
Abbildung 3.2: Anfertigung eines Knochendünnschnitts mit Hilfe eines Mikrotoms
unter Wasserfluss.
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