PHYTO MEDIZIN Mitteilungen der Deutschen ... - Die DPG

Persistent Identifier: urn:nbn:de:0294-pm-2005-2-6
plarisch von A. strictum autofluoreszierende gfp-Transformanten hergestellt
zur deutlicheren Visualisierung der endophytischen Symbionten. Unter Verwendung
von Polyethylenglykol wurden Protoplasten mit den Plasmiden
gGFP,SGFP und pAN7-1 sowie mit dem hph Hygromycin-Resistenzgen als
Marker co-transformiert. Regeneration und Selektion Hygromycin B- resistenter
Kolonien mit der typischen GFP-Fluoreszenz führten nach mehrfacher
Subkultur zu drei stabilen fluoreszierenden Transformanten. Diese wurden in
Versuchen mit sterilisierten Lein-Pflänzchen auf Wasseragar inokuliert, um
die Wurzelbesiedlung mit dem Konfokalen Laser-Scan-Mikroskop zu dokumentieren.
In Biocontrol-Gewächshausversuchen gegen die Fusarium-Welke
(Fusarium oxysporum f. sp. lini) konnte die Eigenschaft zur Resistenzinduktion
sowohl für alle drei Transformanten als auch für den Wildtyp von A.
strictum nachgewiesen werden. Diesen Daten zur Reduktion der Welke werden
Ergebnissen früherer Versuche mit den Wurzelendophyten A. kiliense, A.
ochraceum, und A. strictum gegenübergestellt.
Untersuchungen zur Interaktion von Verticillium ssp. an Wurzeln von
Brassica napus und Linum usitatissimum mittels GFP-markierter
Stämme von Verticillium longisporum und Verticillium dahliae
C. Eynck, B. Koopmann, A. von Tiedemann; Institut für Pflanzenpathologie und
Pflanzenschutz der Universität Göttingen; Grisebachstrasse 6, 37077 Göttingen
Verticillium longisporum ist der Erreger der sogenannten „Krankhaften Abreife“
an Winterraps. Dieser bodenbürtige Pilz ist im Gegensatz zu der nah
verwandten Spezies Verticillium dahliae streng wirtsspezifisch und befällt
nur Brassica-Arten.
Unter standardisierten Bedingungen wurden sowohl Raps (B. napus), als
auch Lein (L. usitatissimum) jeweils mit V. longisporum oder V. dahliae
inokuliert. Beide Pilze wurden mittels Agrobacterium tumefaciens vermittelter
Transformation mit dem grün fluoreszierenden Protein (GFP) markiert,
um die Besiedlung der Wurzel und den Infektionsprozess in vivo dokumentieren
und analysieren zu können. Unter Nutzung verschiedener mikroskopischer
Methoden (Fluoreszenzmikroskopie, REM, CLSM) wurde die Wirt-
Pathogen- bzw. Nichtwirt-Pathogen-Interaktion untersucht, wobei bis dato
folgende Aspekte der jeweiligen Interaktionen beobachtet werden konnten:
Sowohl V. longisporum als auch V. dahliae besiedelten die Wurzel von B.
napus im Bereich der Wurzelhaarzone. Der erste Kontakt zwischen Pilz und
Wurzel erfolgte an den Wurzelhaaren, wo eine Anheftung der Hyphen beobachtet
werden konnte. Von hier ausgehend erfolgte die Besiedlung der Wurzeloberfläche
und die direkte Penetration der Rhizodermis sowohl durch V.
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