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Efecto Antagonista de la Cepa Carnobacterium piscicola sobre ...

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conservados bajo conge<strong>la</strong>ción. La recepción <strong>de</strong> los filetes <strong>de</strong> <strong>la</strong> primera partida<br />

se realizó el 8 <strong>de</strong> diciembre <strong>de</strong>l 2003 y los <strong>de</strong> <strong>la</strong> segunda partida el 03 <strong>de</strong> enero<br />

<strong>de</strong>l 2004.<br />

3.1.3 Bolsas utilizadas para envasar los trozos <strong>de</strong> salmón ahumado en frío<br />

al vacío. Se utilizaron bolsas Cryovac termorretráctiles, con una<br />

permeabilidad al oxígeno <strong>de</strong> aproximadamente 20 a 40 cm 3 /m 2 /24h, 1 atm a<br />

25ºC y 95% H. R.<br />

3.2 Estudio <strong>de</strong>l efecto antagonista <strong>de</strong> <strong>la</strong> cepa C. piscico<strong>la</strong> L103 en contra<br />

<strong>de</strong> L. monocytogenes L4/00, inocu<strong>la</strong>das <strong>sobre</strong> filetes <strong>de</strong> salmón ahumado<br />

en frío<br />

<br />

3.2.1 Etapas preliminares <strong>de</strong>l estudio. Para verificar <strong>la</strong> pureza <strong>de</strong> <strong>la</strong> cepa<br />

bacteriana en estudio y <strong>de</strong> <strong>la</strong> cepa indicadora, los cultivos conge<strong>la</strong>dos se<br />

repicaron en 10 ml <strong>de</strong> caldo<br />

D-MRS (ANEXO 1) y Soya Tripticasa (ST)<br />

(ANEXO 1), incubadas a 25 ºC/48h y 32 ºC/18h, respectivamente. Se realizó <strong>la</strong><br />

tinción <strong>de</strong> Gram para observar <strong>la</strong> morfología y contro<strong>la</strong>r <strong>la</strong> pureza <strong>de</strong> los<br />

cultivos. También se hicieron <strong>la</strong>s pruebas <strong>de</strong> cata<strong>la</strong>sa y oxidasa a cada una <strong>de</strong><br />

<strong>la</strong>s cepas.<br />

Para <strong>la</strong> estandarización <strong>de</strong> <strong>la</strong> concentración <strong>de</strong> célu<strong>la</strong>s <strong>de</strong> C. piscico<strong>la</strong> para el<br />

inóculo, se efectuaron recuentos en superficie en p<strong>la</strong>cas con agar D-MRS y se<br />

<strong>de</strong>terminó <strong>la</strong> <strong>de</strong>nsidad óptica (absorbancia) <strong>de</strong>l cultivo a 660 nm (Equipo<br />

Spectronic Génesis 5, USA) a <strong>la</strong>s 18, 24 y 27 h (ANEXO 2). Por otra parte para<br />

establecer el periodo <strong>de</strong> incubación con mayor actividad antagonista <strong>de</strong> <strong>la</strong> cepa<br />

láctica, se <strong>de</strong>terminó <strong>la</strong> actividad <strong>de</strong> <strong>la</strong> bacteriocina en los mismas horas<br />

indicadas anteriormente, empleando <strong>la</strong> técnica <strong>de</strong> <strong>la</strong> “gota <strong>sobre</strong> césped”<br />

(ANEXO 3), para estandarizar el inóculo durante el tiempo necesario para<br />

obtener <strong>la</strong> mayor actividad antagonista y <strong>de</strong> esta manera obtener mejores

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