BiologÃa del gusano de alambre (Agriotes spp.) - Nasdap.ejgv ...

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material y mÄ todos2.1. LA FASE ADULTA2.1.1 Determinación taxonómicaEn la determinación de las especies se utilizó la morfología de edeago del macho.Para su estudio, se extrajeron los edeagos con los escleritos asociados. Para ello losmachos se colocaron en frío durante 20-30 minutos en pocillos de vidrio con KOH al 10%para destruir los tejidos blandos. Con pinzas muy finas se separaron los segmentos terminalescon la ayuda de una lupa binocular (Leica MZ95). Una vez aislada la terminalia se dejó en lasosa unos minutos más para que se aclarase del todo. Posteriormente se sacaron las piezas dela sosa y se colocaron en agua destilada. Por último, se extrajeron las genitalias y seconservaron en viales con alcohol al 75% junto con los ejemplares machos correspondientes.También se realizaron preparaciones microscópicas con solución de Hoyer-Berlese para poderestudiarlas al microscopio de contraste (Leica DM 4500B). Las distintas partes de la genitaliase contrastaron con literatura científica (Platia, 1994).2.2 EL CICLO DE DESARROLLO2.2.1. Cría en cámara climáticaEl ciclo completo de esta especie se desarrolló en una cámara Heraeus Vötsch (VTPH-500) decondiciones controladas (figura 16). La temperatura fue de 25ºC y el fotoperíodo de 16:8(Furlan, comunicación personal).Figura 16: Cámara con condiciones controladas de temperatura y fotoperíodo.2.2.1.1. Oviposición6346
Biolog• a del gusano de alamBre (Agriotes spp.) en la llanada alavesa y desarrollo de estrategias de control integrado en el cultivo de la patataLa obtención de huevos tuvo lugar a partir de adultos recogidos en campo mediantecaptura en trampas de hierba (ver 2.3.1). Estos se colocaron en cajas de 15x15 cm, a razón decuatro machos por hembra. Se identificaron en el microscopio estereoscópico (lupa binocular)por las diferencias de los caracteres sexuales. Para su alimentación se les suministró hierbafresca cada 3-4 días. Una parte del recipiente se habilitó con arena húmeda para laoviposición. La arena se revisó diariamente durante 60 días registrándose el número dehuevos. La distribución del número de huevos por hembra se intentó ajustar a una distribuciónnormal.2.2.1.2. Desarrollo larvarioDe los huevos recogidos se transfirieron diez a cada uno de los viales destinados aestudiar el ciclo vital. En total se tomaron datos de 65 viales. Los viales fueron de un tamañode 4 cm de diámetro y 12 cm de alto (figura 17). Se rellenaron de turba hasta la mitad de sualtura. Para la alimentación de las larvas, en cada vial se sembraron 4-5 semillas de Loliumperenne (Linnaeus) que fueron renovadas cada 20-25 días. Se taparon con gasa y se colocaronen cajas cerradas para mantener la humedad. El agua utilizada para mantener húmeda la turbafue agua destilada.Dos meses después de la eclosión, las larvas se colocaron en viales individuales paraevitar el canibalismo, que es la principal causa de mortalidad en condiciones de laboratorio(Spilman, 1978).La periodicidad de las mediciones biométricas de las larvas fue de 5-7 días. Para ello seutilizó un micrómetro digital.Figura 17: Viales para el seguimiento del ciclo vital en condiciones controladas. Detalle de unvial con semillas para la alimentación de las larvas.Los resultados de longitud de larvas frente al tiempo se modelizaron como una curvalogística utilizando la regresión no lineal (ver 2.6.2.4 y 2.6.2.5).2.2.2. Cajas de cría al aire libre6447
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Nº 23. Influencia de los procesos
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