Biología del gusano de alambre (Agriotes spp.) - Nasdap.ejgv ...

Biolog• a del gusano de alamBre (Agriotes spp.) en la llanada alavesa y desarrollo de estrategias de control integrado en el cultivo de la patataLos ensayos, uno en laboratorio y posteriormente otro en campo, se realizaron paravalorar su eficacia como control biológico del gusano de alambre, ya que la cepa utilizada hasido encontrada en elatéridos canadienses y desconocíamos su comportamiento en el géneroAgriotes.Para la preparación del micelio del hongo para la inoculación de trigo se siguió elmétodo descrito por Jenkins et al.,(1998).Las colonias de reserva fueron mantenidas a 4 ºC. Las dos semanas anteriores alcomienzo del bioensayo, se repicaron en medio específico para Metharrizium a 24 ºC duranteuna semana (tabla 9).1 % Glucosa1 % Peptona1.5 % Oxgall3.5 % Agar10 μg/ml Dodina (N-dodecylguanidina monoacetato)250 μg/ml Cicloheximida (actidiona)500 μg/ml CloranfenicolTabla 9: Medio específico para Metarhizium (Liu et al., 1993)Las placas de Petri con los cultivos fueron revisados cada dos días con el objeto dedetectar la esporulación de las colonias. Cuando éstas esporulaban, se vertían en cada placa 10ml de Tween y se agitaba en un incubador orbital durante dos horas para conseguir el mayornúmero de esporas.La solución de esporas obtenida fue ajustada a una concentración de 1 x 10 7 y seintrodujo en un Erlenmeyer estéril con medio líquido para Metahrrizium en condiciones deesterilidad. Se tuvo en agitación orbital y en oscuridad a 125 rpm. durante una semana.Posteriormente se inoculó el hongo en un sustrato portador, granos de trigo encondiciones de esterilidad.Se inocularon los granos de trigo con el micelio suspendido en agua destilada (50:50) auna concentración de 150 ml por kilo de trigo.Para la preparación del trigo este fue previamente lavado después se coció sin dejarhervir con 300 ml de agua y 20 ml de aceite de girasol por kg de trigo durante 5 minutos. Unavez que el cultivo masivo de Metharrizium estuvo preparado, este se mezcló con las semillasde trigo. Finalmente se dejó incubando en a 25ºC durante 10-14 días.8063