Manuscrit - laboratoire PROTEE - Université du Sud - Toulon - Var

normés γn des N composants et de l’intensité excitatrice I 0 :
I
3D
( λ , λ ) I Δ ⎜ α ( λ ) Φ γ ( λ )
ex
em
α ( λ ) l α ( λ ) l
ex
em
⎛
⎞ − −
2 2
= 0 x ∑ n ex n n em ⎟e
e
Équation 34
⎝ n
⎠
En posant g = 0,5 et Gn = I 0 Δ xΦ
n , on peut regrouper tous les paramètres constants ou inconnus liés
à l’effet d’écran. Dans l'expression finale du modèle, les termes εn représentent les coefficients
d’absorption molaires normés :
I
3D
⎛
−g
cnε
n ( λex
) + cnε
n ( λem
)
( , λ ) = ⎜ G c ε ( λ ) γ ( λ ) ⎟ e
∑
∏
( )
λ Équation 35
ex
em
⎝
N
n=
1
n
n
n
ex
On constate que le modèle trilinéaire, défini par le terme entre parenthèses, est multiplié par un
terme non-linéaire qui traduit l'influence de l'effet d'écran interne (EEP et EES).
Dans le cas simple d'une solution pure contenant un seul produit, le spectre d'émission de
fluorescence est une fonction qui dépend de la longueur d'onde λem et de la concentration c.
L'expression précédente devient donc :
D
( c)
n
em
⎞
⎠
N
n=
1
−g
′ c
I G′
′
3 = ce
Équation 36
Ce modèle a été validé dans le cas d'une solution contenant un seul fluorophore, la fluorescéine
(Luciani, 2007). Sa bonne adéquation avec les données expérimentales est illustrée par la Figure
23 :
Figure 22: Modélisation de l’effet d’écran sur la fluorescéine seule (Luciani, 2007)
III.C.2.d.i Application aux MEEF
Dans cette méthode, un seul instrument est utilisé au lieu de 2 pour la méthode utilisant l'absorbance,
par contre l'échantillon est dilué par un facteur p connu (habituellement égal à 2). Dans tous les cas,
le facteur de dilution p doit être choisi suffisamment faible pour éviter de détériorer le rapport signal
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