ATTI DEL XV CONVEGNO NAZIONALE SIPI Società Italiana di ...

Abstract Comunicazioni
PRESENZA DI MICOBATTERI ATIPICI IN UNA POPOLAZIONE DI CEFALI
DEL MAR LIGURE ORIENTALE
Giorgi I., Ercolini C. * , Pezzolato M., Varello K., Gallo F. * , Bozzetta E., Pavoletti E.,
Prearo M.
Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta; Via Bologna,
148 – 10154 Torino; * Sezione di La Spezia, Via degli Stagnoni, 96 – 19100 La Spezia.
Gli isolamenti di micobatteri atipici in materiale ittico sul nostro territorio, risultano essere
ancora molto scarsi; non sono stati condotti, fino ad oggi, sufficienti piani di monitoraggio
atti a rilevare la loro eventuale presenza in popolazioni selvatiche, sia dulciacquicole che
marine. Le segnalazioni effettuate sul territorio nazionale si basano essenzialmente su
reperti occasionali o più frequentemente su episodi conclamati in situazioni di allevamento,
ma non esiste una ricerca sistematica sulla fauna ittica selvatica che possa tracciare la reale
situazione epidemiologica. A tal scopo è stato intrapreso un monitoraggio a partire dal
maggio e fino ad agosto 2008, con prelievi a cadenza mensile, su cefali appartenenti alle
specie Mugil cephalus e Liza aurata prelevati dalla zona costiera di Bocca di Magra nel
comune di Amelia (SP). Su tutti i soggetti pescati si è condotto l‟esame
anatomopatologico, un esame colturale (su terreni di primo isolamento come Agar sangue
e Marine Agar con prelievo da rene e milza) e un esame colturale su terreni selettivi per la
ricerca di Micobatteri (da fegato); inoltre si è approntato un esame istologico di porzioni di
fegato e di milza per l‟eventuale evidenziazione di granulomi. I campioni di fegato avviati
all‟esame colturale per la ricerca di micobatteri, sono stati omogenati in stomacher,
decontaminati con cetylpiridinium, centrifugati e infine seminati su tubi di Löwenstein-
Jensen e Stonebrink. I terreni sono stati incubati ad una temperatura di 28±2°C fino allo
sviluppo di colonie, oppure, in assenza di crescita, per sessanta giorni dalla data di semina.
Tutte le colonie sviluppatesi sono state colorate con il metodo Ziehl-Neelsen (ZN) e quelle
risultate acido-alcool resistenti trapiantate per la successiva identificazione. La
caratterizzazione fenotipica è stata eseguita valutando la morfologia, la temperatura e la
velocità di crescita, la capacità di produrre pigmento e la fotoinduzione. Inoltre, su ogni
ceppo si sono eseguiti i seguenti test biochimici: arilsulfatasi a 3 e 14 giorni, crescita su
MacConckey senza cristalvioletto, riduzione dei nitrati, capacità di idrolisi del Tween 80,
catalasi semiquantitativa, crescita su terreno con il 5% di NaCl, ureasi, mannitolo, inositolo
e citrato di sodio. Per l‟esame istologico, i campioni prelevati in sede autoptica e fissati in
formalina, sono stati inclusi in paraffina e tagliati al microtomo in sezioni di 4±2 µ di
spessore a diversi livelli. In parte sono stati destinati alla colorazione con Ematossilina-
Eosina e in parte alla colorazione ZN. Sui 146 esemplari esaminati, 61 sono risultati
positivi all‟esame colturale per Micobatteri (41,8%) con l‟identificazione di 19
Mycobacterium fortuitum, 15 M. abscessus, 7 M. flavescens, 2 M. chelonae e 8 per
Mycobacterium spp. Tuttora 10 sono in corso di identificazione. All‟esame istologico,
solamente su 12 esemplari è stato possibile mettere in evidenza la presenza di lesioni
granulomatose a livello soprattutto di milza, con positività marcata alla colorazione di ZN.
I risultati di questo monitoraggio preliminare, su cefali di una ben determinata zona
costiera, hanno evidenziato che la percentuale di pesci interessati da Micobatteriosi ittica è
elevata e si attesta grossomodo sui valori riscontrati per le specie ornamentali. I risultati
ottenuti da questo lavoro possono essere valutati come spia della presenza dell‟infezione
tubercolare anche nell‟ambiente delle acque libere; inoltre, la dimostrata patogenicità di
specie un tempo considerate saprofite, deve fare riflettere sull‟insidiosità di questi
micobatteri, sia per i pesci sia per l‟uomo.
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