ATTI DEL XV CONVEGNO NAZIONALE SIPI Società Italiana di ...

Abstract Comunicazioni
ANOMALIE CONGENITE IN ZEBRAFISH WILD-TYPE E TRANSGENICI
Guerrera M.C. 1 *, Marino F. 2* , Germanà A. 1* , Sfacteria A. 2* , Lanteri G. 2* , Foti F. 2* ,
Macrì B. 2*
1
Dip. di MOBIFIPA, Sez. di Morfologia; 2 Dip. di Sanità Pubblica Veterinaria, Sez. di
Patologia Generale e Anatomia Patologica Veterinaria; * Centro di Ittiopatologia
Sperimentale della Sicilia (CISS) c/o Dipartimento di Sanità Pubblica Veterinaria –
Università degli Studi di Messina.
Lo zebrafish rappresenta un modello ampiamente utilizzato per lo studio della biologia
dello sviluppo; esso offre, inoltre, l‟opportunità di affrontare lo studio di numerose malattie
umane, in virtù di un profilo genetico sovrapponibile per il 96% a quello umano. Il
presente studio rappresenta una nota preliminare sulle malformazioni riscontrate a seguito
dell‟osservazione in vivo del fenotipo di embrioni di Danio rerio, normali e mutanti, nati
presso il Centro di Ittiopatologia Sperimentale della Sicilia dell‟Università degli Studi di
Messina. Dall‟esame morfologico condotto su larve della stessa nidiata di zebrafish wildtype
(24 hpf) è emersa la presenza di malformazioni nel 10% degli embrioni. Nel 2% dei
casi si trattava di mutanti eyeless, nel restante 8% di embrioni con ipoplasia del bulbo
oculare unilaterale. Dall‟ovodeposizione di soggetti diversi, ma sempre wild-type, abbiamo
ottenuto circa 70 uova. Dall‟osservazione eseguita nell‟arco delle 48 hpf, è stato possibile
osservare larve normalmente sviluppate. Con il trascorrere delle settimane è stato possibile
riscontrare un‟anomalia (14,2%), caratterizzata da uno sviluppo corporeo insufficiente, ma
armonico nelle proporzioni, probabilmente ascrivibile a nanismo ipofisario (in fase di
accertamento). Nel 13,3% di un‟altra nidiata, è stata osservata l‟agenesia della piastra
opercolare monolaterale (10%) e bilaterale (3,3%), che interessava l‟opercolo sia nella
porzione fissa che in quella mobile. Inoltre, sono state documentate malformazioni
scheletriche (lordosi) nel 10% dei soggetti della stessa nidiata. Dall‟osservazione di uova a
48 hpf, emesse da zebrafish transgenici (BRN 3C), è emersa la presenza di anomalie
scheletriche a carico dell‟asse vertebrale in corrispondenza delle vertebre pre-emali, emali
e caudali (20%). Sono state riscontrate anomalie delle pinne pettorali, anale e caudale con
ipurale ed epurale deformati, nonché la presenza di un mostro doppio. In una nidiata della
linea transgenica HuC è stato possibile riscontrare anidridia bilaterale (13%) e agenesia del
tratto cefalico (2,5%). Nel 6% dei soggetti di una stessa nidiata di riproduttori transgenici
ISLET, è stato riscontrato encefalocele. La linea transgenica ET-4 non ha presentato alcuna
anomalia congenita. Come è ormai noto, lo zebrafish viene utilizzato come organismo
sperimentale per lo studio di meccanismi genetici alla base di patologie umane congenite,
poiché molti fenotipi, ottenuti mediante mutagenesi diretta, simulano diverse anomalie che
si manifestano durante lo sviluppo umano. Lo zebrafish è oggi ampiamente utilizzato per
affrontare il tema del rapporto intercorrente fra fenotipo e genotipo; come è noto, maggiore
è il grado di variazione morfologica da uno standard di riferimento, il fenotipo selvatico,
maggiore è il grado di “disturbo” genetico e/o epigenetico intervenuto durante lo sviluppo
larvale. Data la bassa incidenza di teratologie gravi riscontrate, ci sentiamo di asserire che
tali alterazioni siano ascrivibili a cause genetiche e non ambientali e, quindi, che la nursery
funziona bene e le linee stabili di transgenici possono essere allevate tranquillamente. Con
il presente studio abbiamo inteso arricchire il materiale iconografico, già presente in
letteratura, relativo alle anomalie congenite riscontrabili in zebrafish wild-type e
transgenici. In fase di accertamento è il probabile coinvolgimento dei geni responsabili di
tali malformazioni.
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