Revista_Analytica Ed 97

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artigo 2
REVISTA ANALYTICA - OUT/NOV 18
Metodologia
Para simular a microbiota autóctone
da região externa bucal,
foram colhidas, com swabs estéreis,
amostras de bocas de voluntários
para detecção de S. aureus.
O swab foi friccionado e rolado em
toda a extensão da boca, colhendo-
-se as amostras nos seguintes intervalos
de tempo, antes de utilizar
o batom, imediatamente após passarem
o batom, meia hora e uma
hora depois. Em seguida, às amostras
coletadas foram depositadas
em tubos de ensaio contendo 10,0
mL de solução salina. Na sequência,
o liquido salino foi distribuído
em porções de 1,0 mL em placas
de petri previamente esterilizadas
pelo método de pour plate em meio
PCA (Plate Count Ágar) conforme
esquematizado na Figura-1. Posteriormente
as placas foram incubadas
a 37ºC durante um intervalo de
tempo de 24 – 72 horas. As amostras
típicas de S. aureus (amarela)
foram replicadas para as placas de
petri contendo Ágar manitol salgado
e as colônias suspeitas foram
selecionadas para a identificação.
Utilizou-se a coloração de Gram e o
teste de catalase e coagulase para
a confirmação da espécie característica
da microbiota.
Figura-1: Esquema do método pour plate utilizado nos testes para
quantificação Figura 1: Esquema e do identificação método pour plate do Staphylococcus utilizado nos testes para aureus. quantificação
e identificação do Staphylococcus aureus.
Fonte: AUTORES DO TRABALHO. DO TRABALHO.
Autores:
Verônica de Castro Ferreira Palhares1,
Alex Magalhães de Almeida2*,
Ivani Pose Martins³.
Resultados e Discussão
Foi utilizada uma placa contendo
apenas o meio de cultura PCA como
referência (Figura-2), e comparou-
-se os demais experimentos com
esta placa, para verificar o grau de
contaminação e crescimento do S.
aureus. Nesta placa não ocorreu
a proliferação de microrganismos,
indicando assim que não houve
contaminação proveniente do ambiente.
Nas amostras onde a pessoa
ainda não tinha feito uso do batom,
foi observado a presença de
5 a 10 colônias, que correspondem
a valores aceitáveis, que são ocasionados
devido à flora normal presente
no corpo humano, E DISCUSSÃO que pro-
nutrientes contribuem para a prolitação
dos microrganismos, e estes
RESULTADOS
porcionar a presença da espécie feração e consequente aumento do
que vive em harmonia sem causar número de colônias. Esses resultados
podem ser melhor visualizados
patologias. Este resultado pode ser
Foi utilizada uma placa contendo apenas o meio de cultura PCA como
visualizado na Figura-3. Nas amostras
coletadas (Figura-2), imediatamente e comparou-se após valores os demais taxa experimentos de crescimento com são esta placa,
no gráfico da Figura-7, onde os
referência
para o indivíduo verificar passar o grau o batom, de contaminação foram notadamente e crescimento significantes. do S. aureus. Nesta placa
observadas 10 a 20 colônias, conforme
O crescimento bacteriano pode
não ocorreu
é evidenciado
a proliferação
na Figura-4.
de microrganismos,
ser dividido
indicando
em quatro
assim
fases. Fase
que não houve
contaminação Aqui não foi observado proveniente uma grande do ambiente. lag onde Nas amostras organismos onde não a aumentam
significativamente
pessoa ainda não
tinha
diferença
feito
numérica
uso do
de
batom,
colônias,
foi
em
observado a presença de
em
5 a
número,
10 colônias, que
relação a primeira coleta. Porém, a pois os microrganismos estão se
correspondem coleta realizada a meia valores hora aceitáveis, e uma que adaptando são ocasionados ao meio. Fase devido log, evidenciada
pelo a presença fato de uma da vez espécie que que vive
à flora normal
presente hora depois, no corpo apresentou humano, crescimento
numérico evidente. Sendo os organismos se adaptam ao meio,
que proporcionar
em harmonia sem causar patologias. Este resultado pode ser visualizado na
a de 30 minutos com 70 colônias o crescimento populacional passa
Figura-3. e na coleta Nas de após amostras 1 hora coletadas a contagem
de colônias superou o valor Fase estacionária, a divisão celular
imediatamente a ocorrer de forma após exponencial. o indivíduo passar o
de 150, conforme pode ser observado,
respectivamente nas Figuras vas células são produzidas com a
decresce a um ponto em que no-
5 e 6. Esse crescimento pode ser mesma velocidade em que as células
antigas morrem. Finalmente a
atribuído a composição do batom,
pelo fato do mesmo conter vários fase em declínio, onde, na medida
micronutrientes, como ferro, zinco que as condições do meio vão se
e cobre, que são parte da alimen-
tornando cada vez menos favoráveis
Figura-2: Placa contendo o meio de cultura PCA. Sendo utilizada apenas
para verificar uma possível contaminação. Figura número Nesta 3: placa A placa não nesta ocorreu foto representa as amostr
Figura crescimento número de 4: Nesta microrganismos, placa é possível boca evidenciando, identificar sem a presença a presença que do não batom, de 10 houve a onde 20 pode ser observada
colônias, contaminação evidencia-se do meio neste externo. caso, a coleta a 10 colônias da região de bucal microrganismos.
imediatamente
após o uso do batom pelo indivíduo.
para a divisão celular, muitas células
perdem a capacidade de se dividir e
morrem (BLACK, 2013).
Nos ensaios realizados, o teste de
gram (Figura-8) revelou cocos em
cachos, catalase (Figura-9) e coagulase
positivo. Na presença de Sal
manitol (Figura-10), algumas bactérias
conseguiram fermentar o manitol,
evidenciando assim presença de
Staphylococcus aureus. O trabalho
revelou que os componentes do
Fonte: AUTORES DO TRABALHO. Fonte: AUTORES DO TR
batom podem contribuir para a proliferação
do S. aureus, entretanto,
Figura 2: Placa contendo o meio de Fonte: Figura AUTORES 3: A placa DO nesta TRABALHO. foto representa
Figura
cultura PCA. Sendo utilizada apenas para as amostras coletadas da boca sem
a afirmativa número 6: quanto Nesta aos imagem elementos tem-se o resultado pertencente a coleta de
verificar uma possível contaminação. a presença do batom, onde pode ser
uma metálicos hora após que ser permitem empregado esse o uso aumento
Figura
do batom. Nesta placa Nota-se não ocorreu evidentemente crescimento de que observada a presença de 5 a 10 colônias
o número de deve número
colônias ser 4: melhor Nesta
é superior estudada, placa
a
é
150.
possível Figura microrganismos, identificar número evidenciando, a presença 5: Nesta que de figura 10 não a 20 é de Figura possivel microrganismos. número observar 6: Nesta os imagem resultados tem-se o resultado pertenc
Figura número 3: A placa nesta foto representa as amostras coletadas da
visto colônias, que foi evidencia-se possível apenas neste evidenciar
o fato, mas não quantifica-lo. boca sem a presença do batom, onde pode ser observada a presença de 5
caso, a correspondentes coleta houve contaminação da região bucal a do coleta meio imediatamente
externo. realizada meia uma hora hora após o ser uso empregado batom. Podese
constatar a presença de cerca de 70 o colônias. número de colônias é superior a 150.
o uso do batom. Nota-se evid
após o uso do batom pelo indivíduo.
a 10 colônias de microrganismos.
Fonte: AUTORES DO TRABALHO.
Fonte: AUTORES DO TRABALHO. Fonte: AUTORES DO TRABALHO. Fonte: AUTORES DO TR
Figura 4: Nesta placa é possível Figura número 5: Nesta figura é possivel Fonte: Figura AUTORES 6: Nesta DO imagem TRABALHO. tem-se o
Figura identificar número a 7: presença Gráfico de comparativo 10 a 20 para observar os resultados correspondentes
dos valores de resultado pertencente a coleta de uma
taxa colônias, evidencia-se neste caso, a a coleta realizada meia hora após o uso hora após ser empregado o uso do
Figura de crescimento número e 5: sua Nesta significância.
Figura número 8: Esta imagem exibe os resultados para o teste de
figura é possivel observar os resultados Figura número 7: Gráfico comparativo para os resultados
coleta da região bucal imediatamente do batom. Pode-se constatar a presença onde pode-se batom. ser Nota-se observado evidentemente em forma que de o cocos com agrupament
correspondentes após o uso do batom a pelo coleta indivíduo. realizada meia de cerca hora de após 70 colônias. o uso do batom. Podese
constatar a presença de cerca de 70
número taxa de de crescimento colônias é superior e sua significância.
a 150.
aspecto de cachos de uva.
colônias.
Fonte: AUTORES DO TRABALHO.
Figura 8: Esta imagem exibe os resultados para o teste
Fonte: AUTORES DO TRABALHO.
Figura 7: Gráfico comparativo para os resultados dos valores de
de gram, onde pode-se ser observado em forma de
Fonte: AUTORES DO TRABALHO.
taxa de crescimento e sua significância.
cocos com agrupamento Fonte: AUTORES com aspecto DO TRABALHO.
de cachos de uva.
Fonte: AUTORES DO TRABALHO.
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Figura número 9: A figura abaixo exibe o resultado do teste de catala
colocado uma porção do isolado de cultura na lâmina, e foi adic
peróxido de hidrogênio a 3%. Aqui pode ser observado a formaç
bolhas, evidenciando assim, ser catalase positiva.