PTB-Jahresbericht 2005
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Nachrichten des Jahres • News of the year<br />
Hintergrundfreie chemische Bildgebung<br />
Die nichtlineare Mikroskopie auf Basis der<br />
kohärenten Anti-Stokes-Raman-Streuung<br />
(CARS) ist ein hochauflösendes molekülspezifisches<br />
Bildgebungsverfahren zur Untersuchung<br />
biologischer und technischer Proben.<br />
Durch eine in der <strong>PTB</strong> entwickelte neuartige<br />
Detektionsmethode konnte die bei der CARS-<br />
Mikroskopie auftretende Kontrastminderung<br />
durch Hintergrundsignale erfolgreich unterdrückt<br />
werden.<br />
Dieses so genannte „gated heterodyne CARS“<br />
(GH-CARS)-Verfahren stellt eine neue Anwendung<br />
phasenkohärenter Femtosekunden-<br />
Superkontinua dar. Es nutzt neben der<br />
Ramanverschiebung die molekülspezifische<br />
Schwingungs-Dephasierungszeit als Kontrastmechanismus.<br />
Gemeinsam mit der Gruppe<br />
von Prof. Eberhard Riedle, LMU München,<br />
konnte hiermit eine Steigerung des Signal-<br />
Hintergrund-Verhältnisses um einen Faktor<br />
>100 gezeigt werden.<br />
Nun wurde das Konzept erfolgreich zur<br />
kontrastverbesserten CARS-Mikroskopie<br />
angewendet. Als Probe dienten 10-mm Polystyrolkugeln<br />
in Wasser, das auf Grund seiner<br />
breiten Raman-Banden starke Hintergrundsignale<br />
liefert. Diese konnten durch die GH-<br />
CARS-Technik signifikant unterdrückt werden.<br />
Mittels GH-CARS-Mikroskopie könnte man<br />
beispielsweise mikroskopische Benzoltröpfchen<br />
im Grundwasser abbilden, wobei wegen<br />
der hohen Frequenzselektivität sogar verschiedene<br />
Benzolderivate unterschieden<br />
werden könnten. Dies wäre mit konventionellen<br />
Licht- und CARS-Mikroskopen unmöglich.<br />
CARS-Aufnahmen von 10-mm Polystyrolkugeln<br />
in Wasser ohne (a) und mit Einsatz des GH-<br />
CARS-Verfahrens (b). Unterhalb der Bilder sind<br />
die Intensitätsprofile entlang der durch die Pfeile<br />
definierten Linien gezeigt.<br />
CARS images of 10-mm polystyrene spheres in<br />
water without (a) and with application of the<br />
GH-CARS procedure (b). Below the images, the<br />
intensity profiles along the lines defined by the<br />
arrows are shown.<br />
20<br />
Background-free chemical imaging<br />
Non-linear microscopy on the basis of coherent<br />
anti-stokes Raman scattering (CARS) is a<br />
high-resolution molecule-specific imaging<br />
procedure for the investigation of biological<br />
and technical samples. A novel detection<br />
method developed at <strong>PTB</strong> allows the contrast<br />
reduction which occurs in CARS microscopy<br />
due to background signals to be successfully<br />
suppressed.<br />
This so-called “gated heterodyne CARS”<br />
(GH-CARS) procedure represents a new<br />
application of phase-coherent femto-second<br />
super continua. In addition to Raman displacement,<br />
it uses the molecule-specific<br />
oscillation de-phasing time as contrast mechanism.<br />
In cooperation with the group of Prof.<br />
Eberhard Riedle, LMU Munich, an increase in<br />
the signal-background ratio by a factor of<br />
>100 could be shown.<br />
Now, the concept was successfully applied to<br />
contrast-improved CARS microscopy. 10-mm<br />
polystyrene spheres in water, which furnishes<br />
strong background signals due to its broad<br />
Raman bands, were used as sample. These<br />
signals could be significantly suppressed by<br />
the GH-CARS technique.<br />
By means of GH-CARS microscopy, microscopic<br />
benzene droplets could, for example,<br />
be imaged in the ground water. Due to the<br />
high frequency selectivity, even a differentiation<br />
between different benzene derivates<br />
would be possible. This would be impossible<br />
with conventional light and CARS microscopes.