Mikrobiologische Diagnostik bei Infektionendes Auges - AWMF

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067/008 – Mikrobiologische Diagnostik bei Infektionen des Auges aktueller Stand: 07/2011 3 Methoden der mikrobiologischen Diagnostik Die Auswahl der mikrobiologischen Diagnostik richtet sich nach dem Probenmaterial und den klinischen und anamnestischen Angaben zum Patienten. Da oft nur kleinste Probenmengen, wie zum Beispiel bei Punktionen der Tränenwege, der Vorderkammer oder des Glaskörpers, gewonnen werden können, ist eine sorgfältige Auswahl der diagnostischen Methoden einschließlich der zu beimpfenden Nährmedien und herzustellenden mikroskopischen Präparate erforderlich. Erfolgt vom Einsender des Probenmaterials keine Spezifikation des Untersuchungsauftrags und/oder fehlen klinischen Angaben, aufgrund derer eine Entscheidung zur Erweiterung oder Spezifizierung der mikrobiologischen Untersuchungen im Labor getroffen werden kann, erfolgt die Materialanlage und Diagnostik gemäß Kapiteln 3.1 und 3.2. 3.1 Mikroskopische Untersuchung Eine mikroskopische Untersuchung dient sowohl der Beurteilung der Zytologie als auch dem Direktnachweis von Bakterien, Pilzen und Parasiten im Untersuchungsmaterial. Eine Gram- Färbung sollte aus allen invasiv gewonnenen Materialien, wie Aspiraten, Punktaten und Biopsien, sowie aus Hornhautabrasiomaterial und Abstrichen der Tränenwege durchgeführt werden [82]. Eine zusätzliche Giemsa-Färbung ist für die Beurteilung der Zytologie sowie zum Nachweis von Parasiten hilfreich. Bei geringer Probenmenge sollte bei Verdacht auf bakterielle Infektion der Gram-Färbung der Vorzug gegeben werden. Bei klinischem oder anamnestischem Verdacht auf Pilzinfektion ist zusätzlich eine pilzspezifische Färbung, wie die Calcofluor-White- oder PAS-Färbung, sinnvoll. Direktpräparate sind indiziert bei Verdacht auf Filzlausbefall der Zilien oder Akanthamöben-Trophozoiten im Hornhautabrasiomaterial oder der Kontaktlinsenflüssigkeit. In Gram-Präparaten von Glaskörper- oder Vorderkammeraspiraten aus entzündeten Augen finden sich typischerweise rundliche oder sphärische Pigmentgranula, die aus Melanin der Iris oder retinalem Pigmentepithel stammen. Diese sollten nicht mit grampositiven Kokken verwechselt werden. Seite 14 von 52
067/008 – Mikrobiologische Diagnostik bei Infektionen des Auges aktueller Stand: 07/2011 Tabelle 6: Mikroskopische Untersuchung von Probenmaterialien bei Augeninfektionen Krankheitsbild Probenmaterial Gram Giemsa Lidphlegmone, Orbitaphlegmone Pilzspezifische Färbung Aspirat, Sekret x - - Granulomatöse Blepharitis* Lidbiopsie - x - Kanalikulitis Sekret x - x Dakryozystitis/-adenitis Sekret x - - Konjunktivitis, eitrig Sekret x - - Konjunktivitis, neonatal Sekret x - - Keratitis, eitrig Hornhautabrasiomaterial x - x Glaskörper-, Vorderkammermaterial Endophthalmitis x - x** *ggf. außerdem Färbung auf säurefeste Stäbchen, **insbesondere bei endogener und traumatischer Endophthalmitis 3.2 Kulturelle Untersuchung Die Materialanlage primär steriler intraokularer Proben muss zum Ausschluss von Kontaminationsgefahren in einer Sicherheitswerkbank erfolgen. Da das für die mikrobiologische Diagnostik von Augeninfektionen zur Verfügung stehende Probenmaterial insbesondere bei intraokularen Infektionen begrenzt ist, muss in Abhängigkeit des klinischen Bildes und der anamnestischen Angaben eine sorgfältige Auswahl der zu verwendenden Kulturmedien erfolgen. In Tabelle 7 ist die Auswahl der Kulturmedien dargestellt, die zum Nachweis der häufigsten Infektionserreger als Basisanforderung beimpft werden sollten. Auf die Anlage eines Selektivagars für Gram-negative Bakterien, wie MacConkey-Agar, wird verzichtet, da in den untersuchten Probenmaterialien nicht mit einer ausgeprägten Begleitflora zu rechnen ist. Reicht das Probenmaterial für den Plattensatz der Basisanforderung nicht aus, so sollte der Beimpfung des Flüssigmediums der Vorzug vor anaeroben Blut-Agarplatten gegeben werden. Das Probenmaterial wird grundsätzlich semiquantitativ mittels Dreiösenausstrich auf die Platten ausgebracht. Bei geringvolumigen flüssigen Proben, wie Glaskörperaspiraten, ist es sinnvoll, einen Tropfen der Probe in die Mitte einer Kulturplatte zu geben und diesen mittels einer sterilen Impföse etwas zu verteilen, um eine hohe Erregerdichte am Beimpfungsort bei minimaler Kontaminationsgefahr zu erzielen. Hornhautabrasiomaterial und Biopsien sollten aus dem Transportmedium direkt auf die Kulturplatten überführt werden. Eine Homo- Seite 15 von 52
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