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ERGEBNISSE
A
B
Abb. 20: C3-Spaltung von Kallikrein und Plasmin in humanem Plasma
Kallikrein und Plasmin spalteten sowohl in EGTA- als auch in EDTA-Plasma C3 zu C3b und C3a.
Plasmin degradierte C3b weiter. Ein Prozent NHP wurde mit 200 nM Kallikrein, 200 nM Plasmin
beziehungsweise 350 nM Properdin 30 min bei 37°C inkubiert. Die C3-Spaltprodukte wurden mittels
SDS-PAGE aufgetrennt und mittels Westernblot mit (A) Ziege-anti-C3-Antikörper und mit (B)
Kaninchen-anti-C3a-Antikörper (Proben nicht reduziert) detektiert. Die α´-Kette wurde mit einem Pfeil
in orange, zusätzliche C3-Spaltprodukte mit grauen Pfeilen markiert.
3.7.2 Faktor B-Spaltung durch Kallikrein und Plasmin in Plasma
Weiterhin wurde die kallikrein- und plasminvermittelte Prozessierung von Faktor B im Plasma
untersucht. Dafür wurde gesundes humanes Plasma mit Kallikrein beziehungsweise Plasmin
inkubiert und die Faktor B-Spaltprodukte im Westernblot nachgewiesen (Abb. 21C).
Unter Bedingungen bei denen das Komplementsystem durch Anwesenheit von 10 mM EDTA
komplett gehemmt wurde, spaltete Kallikrein Faktor B in die typischen Aktivierungsprodukte
Bb und Ba mit den Molekulargewichten 60 und 30 kDa (Spur 3). Wurde Plasma mit Plasmin
in Gegenwart von EDTA inkubiert, entstanden ebenfalls die Faktor B typischen Banden mit
den Molekulargewichten 60 und 30 kDa. Weiterhin wurde durch Plasmin eine zusätzliche
Bande mit der Mobilität von 48 kDa generiert (Spur 4, grauer Pfeil).
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