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ERGEBNISSE
Das Fragment β2GPI I-IV hemmte den alternativen Komplementweg. Mittels Zymosanversuch wurde
humanes Plasma mit Zymosan und β2GPI I-V beziehungsweise den Proteinfragmenten β2GPI IV-V
und β2GPI I-IV sowie dem Komplementregulator Faktor H inkubiert und mittels SDS-PAGE und
Westernblot auf die Generierung von C3a untersucht (Kaninchen-anti-C3a-Antikörper).
3.9.3 Interaktion von β2GPI I-IV mit C3b
Das Spaltprodukt C3b spielt sowohl als Teil der C3-Konvertase eine zentrale Rolle bei der
Komplementaktivierung als auch bei der Markierung von Fremdoberflächen. Um zu
überprüfen, ob β2GPI Einfluss auf die Funktion von C3b hat, wurde zunächst mittels ELISA
die Interaktion von β2GPI mit C3b untersucht. Das C-terminal deletierte Fragment β2GPI I-IV
interagierte dosisabhängig mit C3b (Abb. 28). Die Absorptionskurve stieg mit zunehmender
Menge von β2GPI I-IV. Das ringförmig geschlossene Protein β2GPI I-V sowie die N-terminal
deletierte Proteinmutante β2GPI VI-V zeigten keine Interaktion mit C3b.
Abb. 28: Interaktion von β2GPI mit C3b
β2GPI I-IV band dosisabhängig C3b. In einem ELISA wurde immobilisiertes C3b mit β2GPI I-V, β2GPI
I-IV und β2GPI IV-V inkubiert und Interaktionen mittels Kaninchen-anti-β2GPI-Antikörper detektiert.
Dargestellt wurden die Mittelwerte und Standardabweichungen aus drei unabhängig durchgeführten
Versuchen (* p < 0,05).
3.9.4 Einfluss von β2GPI I-IV bei der Faktor I-vermittelten C3b-Spaltung
Die Generierung von C3b ist streng reguliert, damit eine Überaktivierung der
Komplementreaktion verhindert wird. Auf gesunden körpereigenen Zellen kann C3b
vermittelt durch Faktor I in Gegenwart von Faktor H zu iC3b gespalten werden (Abb. 29B)
und steht nicht mehr für die Generierung weiterer C3-Konvertasen zur Verfügung. Da β2GPI
I-IV C3b bindet, wurde überprüft, ob diese Interaktion die C3b-Inaktivierung durch Faktor I
und Faktor H beeinflusst. C3b, Faktor I und Faktor H wurden mit ansteigenden Mengen von
β2GPI I-IV inkubiert und die C3b-Spaltprodukte per Westernblot analysiert (Abb. 29A).
β2GPI I-IV verstärkte die Kofaktoraktivität von Faktor H bei der Faktor I-vermittelten C3b-
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