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ERGEBNISSE
3.8.2 Inaktivierung von kallikreingeneriertem C3b durch Faktor H und Faktor I
Ob das kallikreingenerierte C3b durch Faktor I und Faktor H gespalten werden kann, wurde
im Folgenden untersucht. Dafür wurde kallikreingeneriertes C3b mit Faktor H und Faktor I
inkubiert. Die Generierung von iC3b wurde mittels SDS-Page und Westernblot unter
Verwendung von Ziege-anti-C3-Antikörper nachgewiesen. Dieser Antikörper erkannte ein für
iC3b charakteristisches Fragment mit einem Molekulargewicht von 68 kDa.
Kallikreingeneriertes C3b wurde durch Faktor I in Gegenwart von Faktor H inaktiviert,
ersichtlich durch den Nachweis der C3b-Spaltprodukte mit den Mobilitäten von 68, 46 und 43
kDa (Abb. 24A, Spur 4). Diese charakteristischen Reaktionsprodukte entstehen bei der
Spaltung der α´-Kette durch Faktor I in Anwesenheit von Faktor H (Abb. 24B) und beweisen,
dass iC3b generiert wurde. In einem Kontrollansatz wurde C3b mittels C3-Konvertase des
alternativen Weges gebildet und durch Faktor H und Faktor I inaktiviert (Abb. 24A, Spur 8).
Die iC3b-typischen 68, 46, und 43 kDa-Banden konnte auch hier nachgewiesen werden. Die
Bildung von C3b durch Kallikrein beziehungsweise der C3-Konvertase des alternativen
Weges aus C3 wurde durch die α´-Kette in Höhe von 114 kDa nachgewiesen (Spuren 2+6).
Faktor I, ohne Kofaktor, konnte das generierte C3b nicht abbauen (Spuren 3 und 7)
A
B
Abb. 24: Kofaktoraktivität von Faktor H bei der Faktor I-vermittelten Inaktivierung von
kallikreingeneriertem C3b
C3b generiert durch Kallikrein wurde durch Faktor I in Anwesenheit von Faktor H inaktiviert. (A) Mittels
Kofaktorversuch I wurden zunächst durch Inkuabtion von C3 mit Kallikrein beziehungsweise der C3-
Konvertase des alternativen Weges C3b generiert. Anschließend wurden Faktor H und Faktor I
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