Inaugural Dissertation - Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg

3. Biologische Grundlagen
gebräuchlichsten. YFP kann mit der 514nm Linie des Argon-Ionen-Lasers angeregt werden und besitzt
sein Emissionsmaximum bei ca. 530nm. Bei den in dieser Arbeit vorgestellten Messungen an E. coli-
Bakterien wurden die jeweiligen Proteine mit YFP markiert.
Es konnte inzwischen gezeigt werden, dass sich auch spektral nah beieinander liegende fluoreszente Proteine
voneinander unterscheiden lassen. Dies geschieht über das Verhältnis von Transmission und Reflexion
an einem dichroitischen Strahlteiler [Gun11]. Die Anregungs- und Emissionsspektren verschiedener
fluoreszenter Proteine sind in Abbildung 3.1.2 zu sehen.
Abbildung 3.1.1.: (a) Sekundärstruktur des grün fluoreszierenden Quallenproteins (GFP) aus Aequorea
victoria, ein 11-strängiger β-Tonne mit coaxialer α-Helix. (b) Zentrales Chromophor des GFP (grün).
(c) Chromophor der Ser 65 Thr Mutante von GFP. Für die Fluoreszenz essentiell sind zwei coplanare Ringe,
die das Elektronenresonanzsystem bilden. Der erste Ring (Pfeil) wird von Glycin 67 und Threonin 65
gebildet, deren Zyklisierungsreaktion vom Protein selbst katalysiert wird. Tyrosin 66 bildet den zweiten
Ring [VV05].
Abbildung 3.1.2.: (A) Anregungs- und (B) Emissionsspektren der fluoreszenten Proteine: blau (BFP),
cyan (CFP), grün (GFP), gelb (YFP) und rot (mRFP1) [LSP03].
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