DIPLOMARBEIT Untersuchungen zur Lignanführung von Magnolia ...

Experimenteller Teil
300 50 50
200 50 50 +5
200 50 50 +10
200 50 50 +15
600 100
Tab. 26 Verwendete Laufmittel zur Auftrennung des DCM-Extraktes
Mit Hilfe eines Fraktionssammlers (Isco Foxy 200 collect) konnte mit je 1000 Tropfen
pro Eprouvette die Probe aufgefangen.
Anhand von Dünnschichtchromatographie wurde visuell, unter UV (254 nm und 366
nm), mit Vanillin/Schwefelsäure-Reagenz und anschließendem Erhitzen detektiert
und so eine erste Fraktionierung von V0 bis V12 vorgenommen werden.
Fraktion
Ausbeute in
g
Vereinigte
Fraktionen
zu je 25 ml
Fraktion
Ausbeute in
g
Vereinigte
Fraktionen
zu je 25 ml
V0 0,087 1-33 V7 0,613 126-141
V1 0,767 34-51 V8 0,507 142-164
V2 0,135 52-55 V9 0,217 165-182
V3 0,509 56-68 V10 0,949 183-198
V4 1,331 69-91 V11 0,770 199-216
V5 1,167 92-107 V11_NS 0,436 199-216
V6 1,136 108-125 V12 0,064 217-
Tab. 27 Fraktionsübersicht
4.3.4 Aufarbeitung der einzelnen Fraktionen aus dem DCM-Extrakt
Vor der Besprechung der einzelnen Fraktionen ist auch bei Magnolia pyramidata zu
sagen, dass hier mit den gleichen Arbeitsmethoden wie bei Magnolia fraseri
gearbeitet wurde. Somit treffen auch die im vorherigen Kapitel bestimmten
allgemeinen Angaben hier zu.
Bei der RP-18 Festphasenextraktion wurden nicht nur 2 g Säulchen verwendet,
sondern auch 1 g Säulchen, wobei kein signifikanter Unterschied festgestellt wurde.
Es wurden bei den Fraktionen V5 bis V10, jeweils die erste der aus der
Festphasenextraktion gewonnenen Fraktion, benannt S1, weiter für die HPLC
verwendet.
Nach Austausch der präparativen HPLC-Säule konnte die Flussrate auf 20mL/min
gesteigert werden. Dies hatte erhebliche Vorteile bei der Isolierung, da der Zeitraum
der Probeläufe sehr verkürzt werden konnte. Generell ist der Zeitbereich eines
HPLC-Laufs sehr großzügig gewählt worden und somit wurde jeweils nach der
erwünschten Auftrennung der Lauf manuell abgebrochen.
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