Ossäre Regeneration eines experimentellen critical-size Defektes ...

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(EXAKT Apparatebau GmbH, Norderstedt, Deutschland) wurde ein zweiter, plan‐
paralleler Objektträger an das Präparat angeklebt und unter Verwendung des
Trennsystems mitsamt einer möglichst dünnen Knochenprobe vom übrigen Resektat
abgetrennt. Der so entstandene Knochenschliff wurde anschließend auf die ge‐
wünschte Stärke reduziert und erneut hochglanzpoliert.
4.3.2 Herstellung der Dünnschnitte
Für die immunhistochemischen Färbungen wurden die halbierten Knochendefekte
mit dem Kaltpolymerisat Technovit 3040 (Heraeus‐Kulzer GmbH, Hanau,
Deutschland) in Objekthalter (Simport, Beloeil QC, Canada) für eine Microtom‐
Schneidemaschine eingebettet. Am Microtom (LeicaRM2165, Leica Microsystems,
Nussloch‐Heidelberg, Deutschland) wurden dann von jedem Präparat Gewebe‐
schnitte von 3‐5 μm angefertigt. Die gewonnenen Dünnschnitte wurden auf Super‐
frostPlus‐Objektträger aufgezogen (Menzel GmbH& CoKG, Braunschweig,
Deutschland) und bei 58°C über Nacht in einer Spindelpresse getrocknet.
4.4 Untersuchungsmethoden
4.4.1 Mikroradiographie
Die Mikroradiographien wurden nach dem von Freitag (1980) beschriebenen Verfah‐
ren erstellt [27]. Die in Technovit 9100NEU eingebetteten und mit dem EXAKT‐
Trennsystem vorkonfektionierten Gewebeproben wurden mit Hilfe des Mikro‐
schleifsystems auf 100‐120 μm reduziert und hochglanzpoliert. Die Mikroradiogra‐
phie erfolgte mit Hilfe des Faxitron Tischröntgengerätes (Hewlett‐Packard, Ore‐
gon, USA) mit 13‐14 kV Röhrenspannung und 2,5 mA für eine Dauer von 150 sec.
Die Röntgenfilme (InsightS, KodakDeutschland, Stuttgart, Deutschland) wurden
in der radiologischen Abteilung der MKG‐Chirurgie Erlangen entwickelt, in Grau‐
stufen bei 8 bit digitalisiert (Epson4990Photo, EpsonDeutschland GmbH, Meer‐
busch, Deutschland) und im unkomprimierten tif‐Format abgespeichert.