Isolierung und Charakterisierung von Bakterien aus ...

Kapitel 4
Das Peptid m/z 912, 9 hatte ebenfalls in den vorher genannten Testsystemen keine Wir-
kung. Damit weisen die beiden Peptide in unseren Testsystemen keine Aktivitäten auf
und die Testung gegen weitere Testorganismen, Zelllinien oder Enzyme ist zu überle-
gen.
Aminosäureanalyse des Peptides m/z 898,9 im GC/MS
Durch die Messung in der HPLC-DAD/MS wurde festgestellt, dass es sich bei der Sub-
stanz um ein Peptid mit vermutlich acht Aminosäurenresten handelt. Von dem Peptid
m/z 898,9 wurden 300 µg Reinsubstanz, wie im Abschnitt IV beschrieben, hydrolysiert
und mit MTBSTFA derivatisiert. Ebenso wurden 20 proteinogenen L-α-Aminosäuren
mit einer Konzentration von 100 µg derivatisiert. Die Auftrennung und Verdampfung
des Peptides m/z 898,9 und der Aminosäurestandards erfolgte mit dem Gaschroma-
tographen. Durch das Massenspektrometer konnten die einzelnen Aminosäuren detek-
tiert werden. Mit der Datenbank NIST MS Search 2.0 wurden die Peaks identifiziert.
Das GC Chromatogramm zeigte über die gesamte Laufzeit einige Peaks (Abbildung
28). Alle Peaks vor 22 Minuten und nach 30 Minuten sind dem Laufmittel Tetrahydro-
furan und dem Derivatisierungsreagenz MTBSTFA (und eventuelle Verbindungen der
beiden) zuzuordnen.
Abundance
1.7e+07
1.6e+07
1.5e+07
1.4e+07
1.3e+07
1.2e+07
1.1e+07
1e+07
9000000
8000000
7000000
6000000
5000000
4000000
3000000
2000000
1000000
Time-->
0
8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00 30.00 32.00 34.00
Abbildung 28: GC Chromatogramm des Peptides m/z 898,9.
In der Retentionszeit zwischen 23-30 Minuten befinden sich die Peaks der Aminosäuren
der Probe. Es konnten fünf Aminosäuren mit Hilfe der AS-Standards und der NIST MS
2.0 Datenbank identifiziert werden. Die identifizierten Aminosäuren waren Leucin, Iso-
leucin, Alanin, Valin und Phenylalanin (Abbildung 29).
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