Hoffentlich endgültige Druckversion 1 - Stiftung Tierärztliche ...

Inhaltsverzeichnis
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2.10.3. Anwendung der Rasterelektronenmikroskopie im Rahmen des Tissue
Engineering................................................................................................-68-
2.11. Studienspezifische Anwendung der dargestellten Verfahren .......................-68-
3. Material und Methoden....................................................................................-70-
3.1. Geräte und Bezugsquellen................................................................................-70-
3.2. Reagenzien, Verbrauchsmaterialien und Bezugsquellen ..............................-71-
3.3. Versuchsaufbau.................................................................................................-72-
3.4 Isolierung, Expansion und Gewinnung von Knorpelzellen...........................-72-
3.4.1. Knorpelzellenisolierung.............................................................................-72-
3.4.2. Zellkultur....................................................................................................-73-
3.4.3. Ernten der in Zellkultur vermehrten Knorpelzellen...................................-74-
3.5. Besiedlung der Cerasorb ® -Zylinder ................................................................-74-
3.5.1. Besiedlung der Cerasorb ® -Zylinder mit in der Zellkultur vermehrten
Knorpelzellen.............................................................................................-75-
3.5.2. Beschickung der Cerasorb ® -Zylinder mit caninen Knorpelspänen ...........-77-
3.6. Auswertung der Besiedlung und Vitalität der Knorpelzellen.......................-77-
3.6.1. Zellvitalitätstest mit Trypanblau................................................................-77-
3.6.2. Fluoreszenzmikroskopie zur Beurteilung des Zellwachstums...................-78-
3.6.3. Rasterelektronenmikroskopie zur Bestimmung der Zellmorphologie.......-78-
4. Ergebnisse ..........................................................................................................-80-
4.1. Zellkultur-Kontrollen .......................................................................................-80-
4.1.1. Zellvitalitätsnachweis mit Trypanblau.......................................................-80-
4.1.2. Zellwachstumsnachweis durch Fluoreszenzfärbung mit
4´,6-Diamidino-2-phenylindol ...................................................................-80-
4.2. Cerasorb ® -Zylinder mit in der Zellkultur vermehrten caninen
Chondrozyten ....................................................................................................-81-
4.2.1. Zellvitalitätstest mit Trypanblau................................................................-81-