Einflüsse auf die Populationsdynamik von ... - Tierarzt in Ahaus

Dr. Malte Appelius, 48683 Ahaus
Zur Durchführung des HAH-Tests werden folgende Materialien benötigt:
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Das Hämagglutinin ist ein Strukturprotein des Virus und kann als solches in Form von
inaktivierten Virionen oder isolierten Proteinen wirksam sein.
Bei der Erythrozytensuspension handelt es sich um eine 0,25 %ige Lösung in einem geeigneten
Stabilisator. Zum Nachweis einer Parvovirusinfektion eignen sich als Erythrozytenspender die
Maus, das Meerschweinchen oder auch der Mensch.
Außerdem bedarf es einer Verdünnungslösung für das Patientenserum. Diese Lösung dient
gleichzeitig auch als Puffer.
Der Ablauf der Untersuchung gliedert sich in folgende Schritte:
In einem Vorversuch wird die Verdünnung der Hämagglutinine bestimmt, die zu einer
kompletten Hämagglutination führt. Bei dieser Verdünnung liegt eine hämagglutinierende
Einheit (HAE) vor.
Eine konstante Menge von HAE (meist vier HAE) wird mit gleichen Volumina vom
Patientenserum versetzt. Vom Patientenserum ist zuvor eine geometrische Verdünnungsreihe
angelegt worden. Nachdem diese Lösungen miteinander gemischt wurden, werden sie für 60
Minuten bei Zimmertemperatur inkubiert. Sind in dem Patientenserum Antikörper vorhanden,
kommt es während der Vorinkubation zur Blockade der Hämagglutinine durch diese
homologen Antikörper. Sie bilden Immunkomplexe aus.
Im nächsten Schritt werden 100 Mikroliter der Erythrozytensuspension jedem Probenschälchen
zugeführt, gemischt und erneut inkubiert.
Die Ablesung erfolgt gegen schräges Licht oder aber über einem speziellen Ablesespiegel.
Im positiven Fall bleibt eine Hämagglutination aus, d.h. die roten Blutkörperchen fallen nicht
aus. Dies bedeutet, daß eine Infektion stattgefunden hat. Das Ergebnis bzw. das Tier war
positiv (ROLLE u. MAYR, 1993)
2.16.2. ELISA (enzyme linked immunosorbent assay; enzymgebundener Immunadsorptions-
test)
Er dient derzeit in der Virologie als eine hochspezifische, serologische Reaktion zum Nachweis
und zur Identifikation von Virus und Virusantigen. Andererseits kann der ELISA zum
Nachweis und zur Quantifizierung von etwaigen Antikörpern genutzt werden.