Vorwort - Steinbeis-Transferzentrum Infothek

Entwicklung von stabilen Zelllinien zur
Herstellung rekombinanter Proteine
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Bei der Herstellung rekombinanter Proteine in eukaryotischen Zellen sind ausreichend
große Mengen Produkt bei gleichmäßiger Stabilität der Expression über große
Zeiträume kontinuierlicher Kultivierung erforderlich. Häufig stellt die Produktion eine
Belastung für die Zelle dar und führt aufgrund zelleigener Regulationsmechanismen
während der Kultivierung zu einer Abnahme der Expressionsleistung. Dieses „gene
silencing” kann durch Einsatz einer Technologie, die Wissenschaftler des STZ entwickelt
haben, verhindert werden.
Die Aufgabenstellung:
Für das Screening von Substanzbibliotheken auf inhibierende
Wirkung eines Na + / Ca 2+ Austauschers sollte ein
fluoreszenzoptisches Testsystem für den Einsatz im HTS
Format entwickelt werden. Für die stabile Expression des
Transgens sollten CHO Zellen eingesetzt werden.
Anforderung für die stabile Expression waren mindestens
sechs Wochen ausreichend konstante Expression.
Das Problem:
Bisher war es nicht möglich den Na + / Ca 2+ Austauscher
in einer Zelllinie ausreichend stabil zu exprimieren. Für
eine geeignete Analytik ausreichende Mengen an
Transgen konnten nur durch Einsatz eines induzierbaren
Steinbeis-Transferzentrum
Angewandte Biologische Chemie
Mannheim
Leiter: Dr. rer. nat. Manfred Frey
E-Mail: stz359@stw.de
Website: www.stz-frey.de
Promotors erreicht werden. Allerdings führte ein „gene
silencing” innerhalb weniger Passagen zur Abnahme der
Transgenexpression, was einen Einsatz der Zellen im
Screening verhinderte.
Die Lösung:
Durch Einsatz der neuen Technologie konnten geeignete
Zelllinien und darauf aufbauend ein Testsystem etabliert
werden, das alle Anforderungen erfüllte.