Verbesserte Fluoreszenz-in situ Hybridisierung (FISH ... - Mario Nenno
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1.1 Ziel der Arbeit<br />
Ziel der Arbeit war es daher, zu untersuchen, ob sich durch den Abbau der Prote<strong>in</strong>e <strong>in</strong><br />
den Präparaten von Riesenchromosomen von Phaseolus cocc<strong>in</strong>eus cv. Hammond's<br />
Dwarf Scarlet die <strong>Fluoreszenz</strong>-<strong>in</strong> <strong>situ</strong> <strong>Hybridisierung</strong> (<strong>FISH</strong>) verbessern läßt, sodaß<br />
auch die Phaseol<strong>in</strong>-Gene lokalisiert werden können.<br />
Dazu sollte zunächst <strong>in</strong> e<strong>in</strong>em Testsystem die Wirkung verschiedener Protease-<br />
Vorbehandlungen verglichen werden, um e<strong>in</strong>e Protease auszuwählen, die zwei<br />
Bed<strong>in</strong>gungen erfüllen sollte. E<strong>in</strong>erseits muß sie zu e<strong>in</strong>er Verbesserung der<br />
Markierungen führen, andererseits darf sie jedoch die Morphologie der Chromosomen<br />
nicht zu stark schädigen, damit die bisher bekannten Merkmale der Hetero-<br />
chromat<strong>in</strong>verteilung nicht verloren gehen.<br />
Im H<strong>in</strong>blick auf spätere Mehrfach-ISH sollte zusätzlich FITC-dUTP als direktes<br />
Detektionssystem für die Lokalisation der ribosomalen Gene getestet werden .<br />
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