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Ill. Etudes du film Lan gmuir-Blodgett enzymatique T. Miyasaka, K. Koyama and T. Watanabe, Chemistry Letters, (1990) 627. J. Anzai, S. Lee, T. Osa, Makromol, Chem. Rapid Commum. 10 (1989)167. J. Anzai, J. Hashimoto, T. Osa and T. Matsuo, Analytical Sciences, 4 (1988) 247. A. A. Shulga, L,I. Netchiporouk, A.K. Sandrosky, A.A Abalov, OS. Frolov, Y. G. Kononenko, H. Maupas, C. Martelet, Sensors and Actuators B, 30(1996)101. K. Wan, J.M. Chovelon, N. Jaifrezic-Renault, Langmuir, (submitted). D.R. RipoU, C. H. Faerman, P. H. Axelen, I. Suman, and J. L. Sussman. Proc. Nati. Acad. Sci. USA. 90 (1993) 5128. Gaines, G.L. Jr. Insoluble Monolayers at Liquid-Gas Interfaces, (Wiley-Inter-Science) New York, (1966) 226. K. Wan, J.M. Chovelon, F. Gaillard, N. Jaifrezic-Renault, Langmuir, (submitted). 117
III. Etudes du film Lan gmuir-Blodgett enzymatique CONCLUSION: Nous avons montré et confirmé que les molécules dODA sont assez solubles dans l'eau, et ne peuvent pas former de monocouche stable sous certaines conditions de pression de surface importante. Par contre, en présence des molécules d'enzymes, la monocouche devient beaucoup plus stable. C'est à dire que les molécules d'enzymes, en général chargées négativement, peuvent avoir des interactions électrostatistiques avec les 'têtes" polaires des molécules dODA dans la sous-phase à pH 5.5. Donc, des films mixtes enzyme/ODA peuvent être élaborés et transférés sur un substrat solide (Ge ou Silice) ou une surface d'un microcapteur (ISFET par exemple). A partir des isothermes du film mixte, nous supposons qu'il existe une réorganisation des molécules d'enzyme avec des molécules de stéarylamine pour des pressions de surface comprises entre 35 mN/rn et 43 mN/rn. Et ce processus de réorganisation est aussi contrôlé par le temps de relaxation du film, Pour confirmer cette hypothèse, deux techniques de caractérisation des films minces sont utilisées : le FTIR-ATR et IAFM. Les résultats d'infrarouge montrent que les films mixtes enzyme/ODA transférés à la pression de surface 3OrnN/rn ne contiennent pas de molécule d'amine, mais que des molécules d'enzymes sont déposées sur le support. Au contraire, pour les films mixtes enzyme/ODA transférés ¿ la pression de surface de 40 mN/rn, les quantités des molécules d'enzyme et de stéarylamine deviennent plus importantes. Ceci peut être expliqué par un modèle présenté dans la publication (part 2). Nous avons donc choisi pour élaborer des films enzymatiques par la technique Langmuir-Blodgett, une pression de transfert de 40 mN/rn, les films sont transférés et un temps de relaxation du film d'environ 30 min. Au cours de notre travail, un microbiocapteur potentiométrique ( Enzyme-Field-Effect-Transistor) avec 30 couches BuChE/ODA mixtes a été réalisé pour déterminer un pesticide organophosphoré (le trichlorfon). Ce type de biocapteur a permis d'atteindre des limites de détection de 26 ppb soit 10 fois moins que celles obtenues par des membranes polymériques épaisses (cf. chapitre IV.). 118
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