Etude de différentes méthodes de biofonctionnalisation pour la ...

I. Les biocapteurs
conditions douces avec des groupements fonctionnels de l'enzyme, n'intervenant pas dans le
processus de reconnaissance moléculaire. On peut aussi procéder à la silanisation de supports
portant des groupements M-OH pour changer la nature des groupements de surface.
1.4.6. La méthode Langmuir-Blodgett
Comme les protéines (enzymes, anticorps, etc.) possèdent de nombreux groupements
fonctionnels (NH2, COOH, OH, SH...) présents dans les acides aminés constituant la protéine, ils
peuvent interagir avec d'autres molécules présentant des groupements fonctionnels et ainsi les
protéines peuvent être immobilisées dans un film Langmuir-Blodgett. Elles peuvent être
immobilisées à l'intérieur d'une monocouche ou prises en sandwich entre deux monocouches de
molécules amphiphiles. De nombreux travaux ont montré que cette technique douce peut améliorer
les propriétés de la membrane enzymatique, et peut être utilisée pour réaliser des
microbiocapteurs[27-33]. Une partie importante dans notre travail portera sur l'utilisation de cette
méthode pour l'élaboration d'une membrane enzymatique visant ¿ la réalisation d'un nouveau type
de microbiocapteur (cf. Chapitre Ill).
En conclusion, les caractéristiques des méthodes d'immobilisation d'enzyme sont résumées
dans le tableau 1.3.. Ces méthodes doivent garantir différentes conditions:
l'activité de l'enzyme doit être maintenue;
les sites actifs de l'enzyme immobilisée doivent être accessibles par le substrat;
- le transport de masse des substrats et des produits doit être possible ¿ l'intérieur de la
membrane enzymatique.
On classe en général toutes les méthodes d'immobilisation en deux grandes catégories:
les monocouches constituées par la méthode d'adsorption,
d'adsorption-réticulation, de
couplage covalent et de Langmuir-Blodgett.
Les couches épaisses' constituées, quant à elles par une méthode de réticulation, ou coréticulation,
de piégeage et de microcapsulation.