Etude de différentes méthodes de biofonctionnalisation pour la ...

Annexes
ANNEXE
Conditions de mesure potentiométrique des
bio capteurs
La puce comprenant l'ISFET et le REFET est trempée dans 10ml de tampon phosphate (pH
8,0), à température ambiante, sous agitation magnétique. La concentration du chlorure de
butyrylcholine (BuChCI) varie par ajouts successifs. A chaque addition, une variation de pH a lieu
dans la membrane enzymatique, due à l'hydrolyse du substrat de l'enzyme (BuChCI).
L'état
stationnaire est obtenu au bout de 30s. Le chlorure de butyryicholine est ajouté dans la cellule de
mesure jusqu'à une concentration finale de 20mM. La valeur du signal stationnaire du capteur est
enregistrée (S1). Après lavage, le capteur est incubé pendant lo à 60 minutes dans une solution de
trichlorfon. Après un lavage abondant dans le tampon phosphate, la valeur du signal stationnaire du
capteur en présence de la solution de 20mM de chlorure de butyrylcholine est à nouveau enregistrée
(S2). Le niveau d'inhibition de l'enzyme est donné par loo (S1-S2)1S1. Pour réactiver l'enzyme inhibée,
le capteur est trempé pendant 10 à 60 minutes dans une solution de réactivation consistant en une
solution saturée de pyridine-2-aldoxime methiodide (PAM-2) dans du tampon phosphate.
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