CONTROLO DE QUALIDADE DE ÓLEOS DE FRITURA EM ...

que a coloração escura desapareceu e apareceu um tom amarelado. De seguida adicionaram-se umas
gotas de solução de amido e continuou-se a titulação, com agitação forte, até que a coloração azul
desapareceu e a solução ficou incolor.
Os ensaios foram realizados em duplicado.
Paralelamente foi preparado um ensaio em branco.
O índice de iodo (W|), expresso 100 g de gordura, foi calculado utilizando a seguinte equação:
sendo:
i4/_ 12,69 0(^-^)
W| —
m
c concentração, em moles por litro, da solução de tiossulfato de sódio;
VT volume, em mililitro, da solução de tiossulfato de sódio do ensaio em branco;
V2
volume, em mililitro, da solução de tiossulfato de sódio usado na determinação;
m massa, em grama, da toma para ensaio.
9.3.8. Determinação do teor em tocoferóis e tocotrienóis
Os teores em tocoferóis e tocotrienóis dos óleos usados como matérias-primas foram quantificados
por HPLC, de acordo com Amaral eí ai (2005 e 2006), com recurso a um detector de fluorescência.
Foi pesada rigorosamente uma toma de cerca de 0,1 g de amostra para um eppendorf graduado.
Adicionou-se uma quantidade rigorosa de padrão interno (equivalente a 37,5 mg a partir de uma solução
em hexano), e completou-se o volume de 1 ml com n-hexano (Lichrosolv, Merck). Após centrifugação (5
min, 13000 g) transferiu-se o sobrenadante para frascos de vidro com rolha perfurada apropriados para o
injector automático. As amostras foram injectadas no cromatógrafo líquido nas seguintes condições:
• coluna - Inertsil Si de 250 mm x 3 mm (5 um) da Varian, Holanda;
• eluente - n-hexano com 4,5% de dioxano, a 0,7 ml/minuto;
• detector de fluorescência - absorção 290 nm
-emissão 330 nm.
O equipamento de HPLC era constituído por uma bomba PU-980, um injector automático AS-950 e
um detector de fluorescência FP-920, tudo da Jasco (Japão).
Foram calculadas curvas de calibração de 6 pontos para os oito isómeros (a-tocoferol, 3-tocoferol, y-
tocoferol, õ-tocoferol, a-tocotrienol, S-tocotrienol, v-tocotrienol e õ-tocotrienol) com base no mesmo
procedimento aplicado ás amostras. O intervalo de linearidade aplicado, bem como as equações das
rectas obtidas, encontram-se detalhados na Tabela 8. Com base nos seus declives foram calculadas as
concentrações dos diferentes isómeros, em mg/kg de óleo, conforme é descrito no Decreto-lei n.°
106/2005.
Parte experimental 46