Revista Biotecnologia

não-convencionais, e assim poderãopassar também a oferecer possibilidadesde controle de outras classes de pragaseconomicamente tão ou mais importantesdo que as já contempladas. No mundotodo, muitos esforços estão sendorealizados na busca de novas linhagensde Bt que sejam efetivas contra outraspragas específicas. No Brasil, o grupo dadra. Olivia Arantes, da UEL, isolou asubespécie de B.thuringiensis denominadalondrina, que aparentemente pareceatuar sobre lagartas da soja (Anticarsiagematalis).Atingindo níveis adequados deexpressão das toxinas de Bt nasplantasA abordagem inicial de expressargenes para toxinas de Bt em plantas foia de simplesmente colocar regiões depromoção de bactérias ao lado dos genesde Bt, entre os outros genes do genomadas plantas, assim como incluir umaregião de terminação e poliadenilação(Barton et al., 1987 - Fischoff et al., 1987).Na maioria dos casos, o promotor usadoenvolve a região do genoma do vírus domosaico da couve-flor, relativa à expressãode ARN 35S, em abundância (Odellet al., 1985). Este promotor tem sidorelatado como um dos preferidos para aexpressão de vários outros produtosgênicos em plantas geneticamente modificadas.Os primeiros exemplos de plantasde tabaco e tomate transgênicas produziramquantidades tão ínfimas dasproteínas de Bt que não era possível suadetecção (mesmo com o emprego demétodos bioquímicos bastante sensíveis),e conseqüentemente exibindo níveisinsatisfatórios de proteção contra as pragasdestas lavouras. Houve uma melhorasignificativa quando apenas a parte N-terminal das toxinas foi levada à expressãoem células de plantas, mas mesmoassim era insuficiente para trabalhos decampo. Tais plantas geneticamente modificadaseram recomendadas apenaspara regiões com pragas altamente sensíveisàs toxinas envolvidas. O grupo daBélgica da Plant Genetics Systems (PGS)conseguiu substanciais incrementos daexpressão de genes de Bt através daexploração de um sistema de seleçãoacoplada. Neste caso, associou-se à expressãodos genes de interesse um outrogene responsável pela resistência a umantibiótico (Vaeck et al., 1987). Em casosparticulares de expressão de genes diversos,pode ocorrer uma distribuiçãonormal dos níveis de expressão devido àinfluência da localização dos genes emdiferentes locais de cromossomos diferentesda planta hospedeira. Apenas umpequeno número de transformantes foramprodutores de níveis altos das toxinase os pesquisadores belgas elaboraramuma estratégia para selecionar taisclones. Eles elevaram a concentração doantibiótico nos meios de seleção, e comisso selecionaram os melhores clonesprodutores do antibiótico, e, por conseguinte,também estes clones foram osmelhores produtores das toxinas de Bt,uma vez que os genes para ambos produtosestão fundidos (região N-terminaldo produto do Bt com o gene daneomicina fosfotransferase (NptII). Deveser lembrado que as células deB.thuringiensis produzem as moléculasde proteína cristal na forma de prótoxinas,que só serão ativadas quandono trato digestivo dos insetos-alvo, apósa remoção da parte relativa ao C-terminal.Assim sendo, as montagens que seBiotecnologia Ciência & Desenvolvimento 15