13.07.2015 Views

Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid

Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid

Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Katses indutseeriti 37°C juures kasvavas kultuuris GFP süntees. Seejärel viidi rakud induktoritasöötmesse <strong>ja</strong> hoiti sõltuvalt külma-või kuumatundlikusest tund temperatuuril 30°C või 42°C.Rakkude 30°C või 42°C juurde asetamine oli ühtlasi ka proovide võtmise alguspunktiks. Edasikasvatati rakke 37°C juures <strong>ja</strong> jätkati proovide kogumist.Bakterite GFP-sisalduse voolutsütomeetriline analüüs näitas, et kõik külmatundlikud tüved <strong>ja</strong>kuumatundlikest tüvedest GM36 dnaX(ts), AX655 ftsI(ts) E177 dnaA(ts) ning NH4920 recA(ts)käitusid kasvamisel ühesuguselt: kõik rakud läksid kasvama <strong>ja</strong> kahte kasvamise kiiruse järgiselgelt eraldatavat populatsiooni ei täheldatud. Ebasobival temperatuuril oli bakterite kasv vägaaeglane, aga <strong>kasvu</strong>olude normaliseerumisel hakkasid bakterid kiiremini kasvama. Tüvel AX655ftsI(ts) toimus kohe peale katse algust järsk langus GFP-d sisaldavate partiklite arvus, ningsuurenes väga madala GFP hulgaga partiklite arv. Arvatavasti põhjustas antud as<strong>ja</strong>olu bakteritelüüsumine katse algul. Seda pole kontrollitud ning va<strong>ja</strong>b täiendavat uurimist. Osad tüved(CM5255 polA(ts), KY1429 rpoH(ts), HC123 dnaN(ts)) moodustasid eeldatavalt filamente:täheldatati nende suurenemist otsehajuvuses <strong>ja</strong> külghajuvuses, kuid GFP tase rakus jäi samaks.Ka teistes töödes on täheldatud polA <strong>ja</strong> rpoH kuumatundlike mutantide puhul filamenteerumist(Monk jt., 1973; Raheb jt., 2007). Filamentide uurimist <strong>ja</strong> määramist voolutsütomeetria abil onkirjeldanud H. J. Wickens <strong>ja</strong> R. J. Pinney (Wickens jt., 2000). Mikroskoobi all ei ole neid veelvaadeldud. Tulemused on esitatud joonisel 6. <strong>ja</strong> joonisel 7.. Antud katse tulemustest võibjäreldada, et ebasobiv temperatuur ei tekita kõigis külma-või kuumatundlikes tüvedes <strong>kasvu</strong><strong>heterogeensus</strong>t.26

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!