Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid
Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid
Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Katses indutseeriti 37°C juures kasvavas kultuuris GFP süntees. Seejärel viidi rakud induktoritasöötmesse <strong>ja</strong> hoiti sõltuvalt külma-või kuumatundlikusest tund temperatuuril 30°C või 42°C.Rakkude 30°C või 42°C juurde asetamine oli ühtlasi ka proovide võtmise alguspunktiks. Edasikasvatati rakke 37°C juures <strong>ja</strong> jätkati proovide kogumist.Bakterite GFP-sisalduse voolutsütomeetriline analüüs näitas, et kõik külmatundlikud tüved <strong>ja</strong>kuumatundlikest tüvedest GM36 dnaX(ts), AX655 ftsI(ts) E177 dnaA(ts) ning NH4920 recA(ts)käitusid kasvamisel ühesuguselt: kõik rakud läksid kasvama <strong>ja</strong> kahte kasvamise kiiruse järgiselgelt eraldatavat populatsiooni ei täheldatud. Ebasobival temperatuuril oli bakterite kasv vägaaeglane, aga <strong>kasvu</strong>olude normaliseerumisel hakkasid bakterid kiiremini kasvama. Tüvel AX655ftsI(ts) toimus kohe peale katse algust järsk langus GFP-d sisaldavate partiklite arvus, ningsuurenes väga madala GFP hulgaga partiklite arv. Arvatavasti põhjustas antud as<strong>ja</strong>olu bakteritelüüsumine katse algul. Seda pole kontrollitud ning va<strong>ja</strong>b täiendavat uurimist. Osad tüved(CM5255 polA(ts), KY1429 rpoH(ts), HC123 dnaN(ts)) moodustasid eeldatavalt filamente:täheldatati nende suurenemist otsehajuvuses <strong>ja</strong> külghajuvuses, kuid GFP tase rakus jäi samaks.Ka teistes töödes on täheldatud polA <strong>ja</strong> rpoH kuumatundlike mutantide puhul filamenteerumist(Monk jt., 1973; Raheb jt., 2007). Filamentide uurimist <strong>ja</strong> määramist voolutsütomeetria abil onkirjeldanud H. J. Wickens <strong>ja</strong> R. J. Pinney (Wickens jt., 2000). Mikroskoobi all ei ole neid veelvaadeldud. Tulemused on esitatud joonisel 6. <strong>ja</strong> joonisel 7.. Antud katse tulemustest võibjäreldada, et ebasobiv temperatuur ei tekita kõigis külma-või kuumatundlikes tüvedes <strong>kasvu</strong><strong>heterogeensus</strong>t.26