13.07.2015 Views

Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid

Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid

Echerichia coli kasvu heterogeensus ja toksiin-antitoksiini süsteemid

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

TA süsteemi valkude sünteesi (0 min). Peale seda valgusünteesi induktor eemaldati <strong>ja</strong> rakke kasvatati edasi 37°Cjuures. Rakkude <strong>ja</strong>gunemise jälgimine toimus GFP lahjenemise järgi: mida vähem rakud GFP-d sisaldavad, sedarohkem <strong>ja</strong>gunemisi on nad peale GFP sünteesi induktori eemaldamist läbi teinud. Histogrammide kohal on märgitudüleekspresseeritud TA süsteemi <strong>toksiin</strong>i nimi punasega <strong>ja</strong> TA <strong>toksiin</strong>ide alla mittekuuluva valgu nimi rohelisega. AJigaon tähistatud aeglaselt <strong>ja</strong>gunev, KJ-iga kiiresti <strong>ja</strong>gunev, MJ-iga mitte <strong>ja</strong>gunev <strong>ja</strong> J-iga <strong>ja</strong>gunev populatsioon.Mustaga on tähistatud 0 min a<strong>ja</strong>punkt, sinisega 90 min a<strong>ja</strong>punkt <strong>ja</strong> oranžiga 150 min a<strong>ja</strong>punkt.Joonis 9. Toksiinide (märgitud punasega) RelE <strong>ja</strong> YafQ ning chaperoni (märgitud rohelisega) DnaJ üleekspressioonimõju raku <strong>kasvu</strong>le vaadelduna ühe raku tasemel dotblotina. GFP-d sisaldavates rakkudes indutseeriti tund aega TAsüsteemi <strong>toksiin</strong>ide või mitte TA süsteemi valkude sünteesi (0 min). Peale seda valgusünteesi induktor eemaldati <strong>ja</strong>rakke kasvatati edasi 37°C juures. Rakkude <strong>ja</strong>gunemise jälgimine toimus GFP lahjenemise järgi: mida vähemrakud GFP-d sisaldavad, seda rohkem <strong>ja</strong>gunemisi on nad peale GFP sünteesi induktori eemaldamist läbi teinud. AJigaon tähistatud aeglaselt <strong>ja</strong>gunev, KJ-iga kiiresti <strong>ja</strong>gunev, MJ-iga mitte <strong>ja</strong>gunev <strong>ja</strong> J-iga <strong>ja</strong>gunev populatsioon.2.2.4. relBE ei mõjuta bakterite <strong>ja</strong>gunemisvõimet statsionaarsest faasistväljudes.Peale statsionaarse faasi bakterite värskesse söötmesse viimist ei hakka kõik bakterid korragakasvama. Suur osa neist jääb mittejegunevaks (Joers jt., 2010; Roostalu jt., 2008). Sellemitte<strong>ja</strong>guneva alampopulatsiooni hulka kuuluvad persistorid. On näidatud, et sellesmitte<strong>ja</strong>gunevas alampopulatsioonis on TA geenide, sealhulgas relBE transkriptsioonindutseeritud (viitab <strong>toksiin</strong>ide aktivatsioonile) (Keren jt., 2004; Shah jt., 2006). Katseeesmärgiks oli võrrelda üksikraku tasemel metsiktüübi (MT) <strong>ja</strong> ∆relBE kasvamahakkamist30

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!