Gebrauchsanweisung - virion\serion
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Pos: 27 /Multianalyt/Gültig für alle Dokumente/Durchführung des Tests/Testdurchführung mit V-MTP @ 2\mod_1219408517157_6.doc @ 16004<br />
7.5.2 Testdurchführung mit V-Boden-Mikrotiterplatten<br />
(Waschvorgang mit Mikrotiterplattenzentrifuge)<br />
1. Erforderliche Anzahl Kavitäten der V-Boden-Mikrotiterplatte festlegen und Protokollblatt<br />
anlegen.<br />
2. Je 20 µl der verdünnten Proben bzw. der gebrauchsfertigen Kontrollen in die<br />
benötigten Kavitäten der V-Boden-Mikrotiterplatte pipettieren. Eine Kavität für den<br />
Reagenzienleerwert (RBLK, enthält nur Partikel und Konjugat, keine Probe)<br />
freilassen,<br />
deutsch 18<br />
Kavitäten der V-Boden-Mikrotiterplatte<br />
Kavität A1 Reagenzienleerwert<br />
Kavität B1 CO1 (Standard)<br />
Kavität C1 CO1 (Standard)<br />
Kavität D1 CO2 (Negativkontrolle)<br />
Kavität E1 Patient 1<br />
Kavität F1 Patient 2<br />
… …<br />
3. Je 100 µl der rekonstituierten Partikellösung in alle verwendeten Kavitäten der V-<br />
Boden-Mikrotiterplatte pipettieren (auch in RBLK).<br />
4. Probeninkubation für 30 Minuten (+/- 5 Min) bei 37°C (+/- 1°C) unter permanentem<br />
Schütteln (Schüttelfrequenz 800 rpm). V-Boden-Mikrotiterplatte während der<br />
Inkubation lichtgeschützt abdecken (siehe Kapitel 7.5.3).<br />
5. Am Ende der Inkubationszeit die Kavitäten waschen (siehe nachfolgenden<br />
Abschnitt).<br />
6. Konjugatzugabe<br />
50 µl des gebrauchsfertigen, analytspezifischen Konjugates in alle verwendeten<br />
Kavitäten pipettieren.<br />
7. Konjugatinkubation für 30 Minuten (+/- 5 Min) bei 37°C (+/- 1°C) unter permanentem<br />
Schütteln (Schüttelfrequenz 800 rpm). V-Boden Mikrotiterplatte während der<br />
Inkubation lichtgeschützt abdecken (siehe Kapitel 7.5.3).<br />
8. Am Ende der Inkubationszeit die Kavitäten waschen (siehe nachfolgenden<br />
Abschnitt).<br />
9. Je ca. 200 µl gebrauchsfertigen Messpuffer in alle Kavitäten pipettieren (Volumen<br />
kann in Abhängigkeit des verwendeten Durchflusszytometers variieren.)<br />
10. Resuspendieren der Partikel durch Schütteln für ca. 5 Minuten bei 37°C (+/- 1°C).<br />
V-Boden-Mikrotiterplatte während des Schüttelns lichtgeschützt abdecken (siehe<br />
Kapitel 7.5.3). Alternativ können die Partikel aus der Kavität in Durchflusszytometerröhrchen<br />
überführt werden.<br />
11. Messung am Durchflusszytometer (siehe Kapitel 7.5.4).
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