Wechselwirkungen der V-ATPasevon Manduca sexta mit dem Aktin ...

Material
Sigma: Anti-α-sarcomeric Aktin monoklonale Antikörper (A 2172),
2.2. Medien und Puffer
Anti-Aktin polyklonale Antikörper (A 5060), Alkalische
Phosphatase-konjugierte Anti-Maus IgG (A 3562), Alkalische
Phosphatase-konjugierte Anti-Kaninchen IgG (A 3687), Alkali-
sche Phosphatase-konjugierte Anti-Meerschweinchen IgG (A
5062), Ampicillin, Bisacrylamid, 2ß-Mercaptoethanol, Cy3-
konjugierte Anti-Maus IgG (C 2181), Cy3-konjugierte Anti-
Kaninchen IgG (C 2306), C12E10, DTT, EDTA (freie Säure),
Glukoseoxidase, Imidazol, Katalase, Mineralöl, Na2-ATP, N-
Ethylmaleimid, Ponceau S, Phalloidin, Phalloidin-FITC, kataly-
tische Untereinheit der Proteinkinase A
Ψb-Medium: 5 g Hefeextrakt, 20 g Pepton 140, 5 g MgSO4 pro Liter, pH 7,6
(mit KOH eingestellt)
Ψa-Medium: entspricht Ψb-Medium und 14 g/l Agar
Amidoschwarz: 2,6 mg/ml Amidoschwarz in Essigsäure/Methanol (1:10)
AP-Puffer: 50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 50 mM MgCl2, pH 9,5
BCIP: 50mg/ml 5-Bromo-4-Chloroindoxylphosphat in reinem Di-
methylformamid
Blockpuffer: 3 % Gelatine in TTBSN-Puffer
Detektionspuffer: 45 µl NBT und 35 µl BCIP pro 10 ml APP-Puffer
ET: 5 mM Na2-EDTA, 5 mM Tris-HCl, pH 8,1
Farmers Reducer: 32 mM Natriumthiosulfat und 30 mM Kaliumhexacyanoferrat
(III)
Fluoreszenz-Puffer: 2 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM KCl, 1 mM MgCl2, 0,1 M
DTT, 20 µg/ml Katalase, 0,1 mg/ml Glukoseoxidase und 3
mg/ml Glukose
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