Die Untersuchung des immunoliposomalen Targetings von ...

sensitiver Immunoliposomen für eine antiinflammatorische Therapie muss vor ersten in-vivo-
Versuchen deshalb die genauere Erforschung dieser Vesikel stehen. Dabei soll die Kontrolle
einer eventuellen Seruminstabilität, wie sie bei älteren Arbeiten pH-sensitiver Liposomen
auftrat, im Vordergrund stehen. Danach wurde das liposomale Freisetzungsverhalten in einem
Bereich von pH 4 bis pH 7 untersucht. Fluoreszenzmessungen im Rahmen eines Resonanzenergietransfers
zwischen pH-sensitiven Immunoliposomen und endosomalen Vesikeln
sollten spätere intrazelluläre Wechselwirkungen in einem Modellversuch deutlich werden
lassen.
Serumstabilität:
Freigabe [%]
25
20
15
10
5
0
30 Min. mit Liposomen
30 Min. mit Immunoliposomen
120 Min. mit Liposomen
120 Min. mit Immunoliposomen
3% 1% 0
mol % PEG-PE
Abb. 19: Stabilität pH-sensitiver Liposomen (Typ1) in 40% Serum
Die Serumstabilität der hergestellten pH-sensitiven Immunoliposomen sollte untersucht
werden. Entsprechend Kapitel 3.6.1. wurden sowohl pH-sensitive als auch pH-insensitive
Immunoliposomen des Typs 1 und des Typs 2 hergestellt. Neben der Serumstabilität der
normalen Grundlipidmischung wurde auch der Einfluss gekoppelter Antikörper untersucht.
Deshalb wurden für die Stabilitätsstudien sowohl gekoppelte als auch ungekoppelte
Liposomen verwendet. Durch den Einbau verschiedener Mengen an PEG sollten
Rückschlüsse auf Instabilitäten gezogen werden. Anhand der Daten lassen sich sehr gut
stabilisierende Wirkungen ableiten. Die Instabilitäten im Serum werden auch als seruminduzierte
Freigabe in der Literatur bezeichnet. Die Interaktionen zwischen Liposomen und
im Serum enthaltenen Stoffen sind einfache Ladungs- und/oder hydrophobe Wechselwirkungen.
Die größte Bedeutung besitzt hier die Gruppe der Lipoproteine. Sowohl die
Erhöhung der PEG-Anteile auf der Oberfläche der Liposomen als auch die Anwesenheit von
Antikörpermolekülen bewirkte eine Verringerung der Wechselwirkungen mit Serumproteinen.
Die Ergebnisse anderer Studien [Ng et al. (2000)] zeigten ebenfalls diesen
Stabilisierungseffekt durch PEG. Es wurde deutlich, dass die Polyethylenglykolketten für
spätere in-vivo-Versuche nicht nur Vorteile in Bezug auf Zirkulationszeitverlängerungen,
sondern auch verbesserte Serumstabilitäten erbringen. Für diesen stabilisierenden Effekt
genügte der Einbau von 1mol% PEG-PE. Eine weitere Zunahme der PEG-Anteile auf die
sonst üblichen 5mol% brachte keine nennenswerte Verbesserung und wurde deshalb hier
4.2. In-vitro-Studien von Liposomen an Endothelzellen
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