198 CUPRINS

Figura 4. Dependenţa randamentului procesului de sedimentare a complexului enzimatic
pectolitic de temperatura
e) Dependenţa randamentului sedimentării complexului enzimatic pectolitic de
prezenţa stabilizatorilor
Unii ioni metalici pot exercita acţiune stabilizatoare asupra enzimelor, prezenţa lor
în mediu permite reducerea cantităţii solventului folosit pentru sedimentare şi ameliorarea
structurii sedimentului. Enzimele pectolitice sunt stabilizate şi activate în special
de ionii de Ca 2+ , Mg 2+ şi inhibate de Hg 2+ , Cd 2+ , Pb 2+ [14, 15]. Astfel, pectat liazele sintetizate
de bacteria Paenibacillus sp. BP-23 şi Bacillus sp. BP-7 sunt active în prezenţa
ionilor de Ca 2+ [7]. Activitatea pectinliazei din Pythium splendens este stimulată de
cationii bivalenţi Ca 2+ (+34%), Mg 2+ (26%), mai slab de Sr 2+ (+16%) [1].
Reieşind din cele menţionate s-a veri cat in uenţa diferitor concentraţii a ionilor
de Ca 2+ şi Mg 2+ (adiţionaţi la mediul de sedimentare sub formă de cloruri) asupra randamentului
de sedimentare a enzimelor pectolitice (Fig. 5). Ca martor a servit activitatea
pectolitică a preparatului sedimentat în lipsa ionilor menţionaţi.
Comparând valorile activităţii pectolitice a preparatelor sedimentate în lipsa cationilor
cu cele obţinute la adiţionarea acestora, s-a constatat o creştere a activităţii cu
12% în prezenţa CaCl 2 în concentraţie de 0,1% şi cu 6% - în proba ce conţine 0,25%
de MgCl 2 . Concentraţiile mai mari de Ca 2+ şi Mg 2+ determină reducerea activităţii pectolitice,
la concentraţia de 0,3% valoarea activităţii ind de 165941 u/g la variantele
sedimentate în prezenţa CaCl 2 şi respectiv 164528 u/g la cele cu MgCl 2 .
Cercetările efectuate au scos în evidenţă parametrii optimi de sedimentare ce asigură
recuperarea maximă a enzimelor pectolitice din lichidul cultural al tulpinii Penicillium
viride CNMN FD 04 P: raportul optim de alcool : lichid cultural - 3 : 1, valoarea pHului
mediului - 3,0, temperatura - 5 0 C, durata contactului lichid cultural - solvent – 1
oră, prezenţa CaCl 2 în concentraţie de 0,1%.
Prin sedimentare în condiţii optime stabilite a fost obţinut un preparat enzimatic
pectolitic cu gradul de puri care 10x, sub formă de pulbere de culoare albă-gri, bine
solubil în apă, tampon citrat-fosfat, NaOH-glicină. Preparatul nu conţine celulaze, amilaze,
lipaze. La hidroliza pectinei de sfeclă în condiţii standard (pH – 4,0, temperatură
– 30 0 C) preparatul manifestă activitate pectolitică totală de 182.000 u/g.
143