Svampinfektioner

DIREKTMIKROSKOPI, SVAMP
a. Blankophorfärgning
123
Bilaga 2
Preparation: Biopserad hud, hår och nagelmaterial sönderdelas med skalpell
så att små tunna vävnadsfragment kan placeras på ett objektglas.
Vävnadspreparat får ligga 10 min för bättre digerering. Ev. kan preparatet
värmas försiktigt för att bättre lösa upp nagelmaterial. Likvor, urin och
andra tunna kroppsvätskor centrifugeras vid 1500xg 10 min. En droppe av
sedimentet får torka in på objektglas och 1 droppe Blankophorlösning med
lut tillsätts. Täckglas läggs på. Kan läsas omedelbart.
Blankophorlösning:
Blankophor (B A Bayer) 20 mg
Aq. dest. 22,5 mL
1 mol/L NaOH 22,5 mL
Dimetylsulfoxid 5 mL
Lösningen skyddas mot ljus och förvaras i rumstemperatur
Filter som rekommenderas för Blankophorfluorescens: B 638 + UG1,
barriär K431
Blankophor+NaOH betraktas som den känsligaste metoden men tillgång
till fluorescensmikroskop behövs för att kunna se de fluorescerande
svampcellerna. Observera att dessa preparat även kan betraktas i såväl
ljusfält - faskontrast - som mörkfältsmikroskop (det man är van vid väljs).
Strukturerna syns då på samma sätt som i ett KOH-preparat. Finns ej
tillgång till fluorescensmikroskop görs preparaten i KOH/DMSO (eftersom
det då ej finns anledning att blanda i Blankophor).
KOH och NaOH används för att provmaterialet skall “lösas” upp medan
ev. svamp förblir intakt.
Preparaten kan screenas i förstoring 10x10. Strukturerna studeras mer
noga i 25x10 och ev. 40x10. Gäller (i princip) för allt provmaterial, alla
svampar och färgningar.
Histopatologiska färgningar för svamp, Grocott och PAS, kan göras på
vävnader. Gramfärgning rekommenderas för färgning av granulae vid