zde - 1. lékařská fakulta - Univerzita Karlova

SEKCE POSTGRADUÁLNÍ – TEORETICKÁ ČÁST
PROTEKTIVNÍ A KŘÍŽOVĚ SLIZNIČNÍ IMUNIZACE MYŠÍ INAKTIVOVANÝCH VIREM CHŘIPKY TYPU
A S POUŽITÍM BACILLUS FIRMUS JAKO ADJUVANS
Autoři: Zanvit Peter, Havlíčková Martina, Táčner Jaroslav, Jirkovská Marie, Novotná Olga, Čechová Dana,
Julák Jaroslav, Šterzl Ivan a Prokešová Ludmila
Školitel: doc. MUDr. Ludmila Prokešová, CSc.
Úvod: Aktuálně hrozící nebezpečí vzniku vysoce patogenních chřipkových virů subtypů A s sebou přináší požadavek na vývoj
vakcíny schopné navodit křížovou protekci mezi jednotlivými subtypy viru chřipky. K tomuto cíli jsme se pokusili přispět naší
prací, kde jsme při slizniční imunizaci myší chřipkovým virem typu A použili jako účinné adjuvans delipidovanou frakci Bacillus
firmus (DBF).
Metodika: BALB/c myši byly imunizovány intratracheálně (IT) nebo intranazálně (IN) inaktivovanými viry chřipky typu A
(H1N1 nebo H3N2) a DBF. Systémové a slizniční protilátky byly detekovány pomocí ELISA metody, plicní biopsie jsme charakterizovali
histologicky a in vivo jsme testovali protektivní efekt proti infekci. Dynamiku adjuvantního vlivu na expresi cytokinů
(IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-10), TLR (TLR-2, 3, 7, 9) a iNOS jsme stanovovali pomocí real-time PCR.
Výsledky: Podařilo se nám navodit jak intrasubtypickou tak heterosubtypickou křížovou protekci u myší imunizovaných
inaktivovanými viry chřipky typu A a bakteriálním adjuvans DBF. V intervalu 12-48 hodin po intranazálním podání DBF byla
zaznamenána zvýšená exprese jak Th1 tak Th2 cytokinů. Výrazné zvýšení bylo patrné zejména u IL-10, který hraje klíčovou roli
při izotypovém přesmyku na IgA. Exprese iNOS byla zvýšena dvoufázově, 3 a 72 hodin po podání adjuvans. Adjuvans (DBF)
mělo významný vliv na zvýšení exprese TLR rozpoznávajících bakteriální DNA (TLR-9) a jedno-vláknovou RNA (TLR-7), zatímco
expresi TLR-2 zvyšovalo jen mírně. TLR-7 by se mohl účastnit rozpoznávání RNA viru chřipky.
Závěr: DBF se ukázalo být velmi účinným adjuvans indukující heterosubtypickou protekci vůči chřipce typu A u myší.
Tato práce vznikla za podpory grantů Ministerstva školství, mládeže a tělovýchovy ČR MSM0021620806 a Grantové agentury ČR
310/07/0675.
Příprava na rozdělení cen v Akademickém klubu 1. LF UK ve Faustově domě. Zleva Mgr. Jitka Sýkorová, Pavla Pešatová, Hana Netíková.
31