zde - 1. lékařská fakulta - Univerzita Karlova

2. MÍSTO
SEKCE POSTGRADUÁLNÍ TEORETICKÁ – VÍTĚZNÉ PRÁCE
PROTEINY EXTRACELULÁRNÍ MATRIX VÝZNAMNĚ OVLIVŇUJÍ
VIABILITU A PROLIFERACI GLOMERULÁRNÍCH PODOCYTŮ IN
VITRO
Autor: MUDr. Jan Krtil
Školitel: prof. MUDr. Tomáš Zima, DrSc., MBA, Ústav klinické biochemie a laboratorní
diagnostiky 1. LF a VFN
Úvod: Poškození podocytů vede k rozvoji proteinurie a glomerulosklerózy. Při kultivaci podocytů se
jako standardní kultivační povrch používá kolagen I, který ale není v glomerulární bazální membráně (GBM) fyziologicky přítomen.
Cílem naší práce bylo zjistit, zda různé typy proteinů extracelulární matrix (ECM) ovlivňují vlastnosti kultivovaných podocytů.
Metodika: Primárně kultivované potkanní podocyty byly po první pasáži nasazeny na různé kultivační povrchy: kolagen I,
kolagen IV, extrakt ECM bazální membrány a tkáňový plastik. Sledovali jsme počet adherovaných živých buněk a jejich metabolickou
aktivitu 8 hodin po nasazení (adheze), pak po 5 dnech v médiu s 10 % sérem a po dalších 3 dnech v médiu s 0,5 % sérem.
Výsledky: Adheze buněk byla obdobná nezávisle na použitém kultivačním povrchu. Po 5 dnech v proliferačním médiu výrazně
vzrostl počet buněk na ECM a méně na kolagenu I, intenzita proliferace na kolagenu IV byla variabilně mezi ECM a kolagenem
I. Na samotném plastiku bylo buněk méně než kolik adherovalo. Inkubace v diferenciačním médiu vedla k poklesu počtu
buněk na obou typech kolagenů, zatímco na ECM byl počet buněk zachován.
Závěr: ECM extrakt se nejvíce blíží složení GBM a v našich experimentech poskytl optimální podmínky pro proliferaci a diferenciaci
podocytů. Kultivační povrch zřejmě významně ovlivňuje viabilitu, proliferaci a diferenciaci podocytů.
V sekci postgraduální teoretické se umístil na 2. místě pan doktor Jan Krtil.
87