Bedingungen akzeptieren und Praktikumsbericht - Tobias Arnstadt

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Abbildung 10: Darstellung des Prinzips der HPSEC (Yonemoto, I. 2006)
Für die Untersuchungen in diese Arbeit wurde eine ein HPLC-System der Firma
Hewlett Packard der Serie HP 1050 verwendet. Die Bereitstellung des für das
Einspritzsystem notwendigen Druckes erfolgte dabei durch einen Kompressor des Typs
JUN-AIR 6-x. Der Elutionsstrom wurde durch eine PPS Hema Bio Trennsäule
(Polymer Standard Service Mainz, Porengröße: linear, Partikelgröße 10 µm, 8 x 300
mm) geleitet und anschließend mit einem Diode Array Detector (DAD Agilent 1100
Series DAD G1315B) analysiert.
Für die Analysen wurde immer eine Flussrate der mobilen Phase von 1ml/min gewählt.
Die mobile Phase bestand dabei aus 20% Acetonitril (MERK gradient grade für die
Flüssigkeitschromatographie) und 80% aus einem Salzpuffer. Der Salzpuffer wurde mit
einer Konzentration von 3,44 g/l Natriumchlorid (KMF optiChem, reinst) und 2,00g/l
Dikaliumhydrogenphosphat (Merck wasserfrei, reinst) hergestellt. Die Salze wurden in
entionisierten Wasser mit Hilfe des Ultraschallbades vollständig gelöst. Nachdem die
Salze gelöst waren, erfolgte die Einstellung des pH-Wertes mit Hilfe von Natronlauge
(0,2mol/l) auf den Wert 10. Der pH-Wert von 10 ist nach Kinne 2005 erforderlich, um
bei der Trennung Wechselwirkungen (wie z.B. Wasserstoffbrückenbindungen, ionische
und hydrophobe Wechselwirkungen) zwischen den einzelnen Huminstoffmolekülen zu
verringern und somit Fehler in der Molekulargößenverteilung zu vermeiden. Nach der
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