EIDG. TECHNISCHE HOCHSCHULEN Eidg. Anstalt für ...
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ausserhalb<br />
der Zelle<br />
extrazelluläres<br />
Phosphat<br />
Zeltinneres<br />
91<br />
Dazu wurde in einem ersten Schritt eine Methode entwickelt, welche nach der<br />
Beimischung von radioaktivem 32 P-Phosphat zu einer Zellsuspension dessen Aufnahme<br />
in das intrazelluläre ATP misst. Bei der Bildung chemischer Energie wird<br />
das radioaktive Phosphat (P*) an das ADP (A-P-P) gelagert, wobei ATP (A-P-P-P)<br />
entsteht: P* + A-P-P = A-P-P-P*.<br />
Dieser Vorgang wird als ATP-Regeneration bezeichnet (Abb. 4.33). Da nach der<br />
Zugabe von 32 PO 4 faktisch alle drei Phosphate des ATP radioaktiv markiert werden,<br />
wird das äusserste Phosphat (y-P) enzymatisch vom Rest abgespalten und<br />
sein radioaktiver Anteil (32P/31P = spezifische Aktivität = SA) zu verschiedenen<br />
Zeitpunkten nach der 32 PO 4 -Zugabe bestimmt (Abb. 4.34).<br />
intrazelluläres<br />
Phosphat<br />
Zugabe<br />
von 32PO4<br />
Abb. 4.33 Abb. 4.34<br />
t<br />
P erreicht<br />
^isotopisches<br />
Gleichgewicht<br />
Inkubationszeit<br />
ATP-Regeneration in der Zelle Die Bestimmung der spezifischen<br />
Aktivität von y-P im ATP<br />
Bei der ATP-Regeneration wird das benötigte Phosphat aus dem intrazellulären<br />
Phosphatpool bezogen (Abb. 4.33). Wenn nun gleichzeitig auch die spezifische<br />
Aktivität des intrazellulären Phosphatpools gemessen werden kann (entsprechende<br />
Untersuchungen sind in Vorbereitung), so ist es möglich, die mittlere Aufenthaltszeit<br />
des y-P im ATP zu bestimmen. Daraus kann der Umsatz von y-P im ATP-<br />
Pool berechnet werden. Gelingt dies, so verfügen wir über die Möglichkeit, den<br />
tatsächlichen Energieumsatz in Zellen im Kurzzeitexperiment zu messen.<br />
(P. Bossard, D.M. Karl, University of Hawaii)<br />
Das Verhalten von Nitrilotriacetat (NTA) bei der Infiltration von Flusswasser<br />
ins Grundwasser<br />
A. Simulation des biologischen Abbauverhaltens im Laboratorium<br />
Das Abbauverhalten von NTA wurde in Laborkolonnen untersucht, die mit Flussediment<br />
gefüllt waren und kontinuierlich mit Wasser definierter Zusammensetzung<br />
beschickt wurden. Sowohl unter aeroben als auch unter anaeroben Bedingungen<br />
wurde ein vollständiger, wirkungsvoller Abbau des NTA festgestellt, wobei bei
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